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中国生物工程杂志

CHINA BIOTECHNOLOGY
中国生物工程杂志
中国生物工程杂志  2010, Vol. 30 Issue (06): 84-88    DOI: Q819
技术与方法     
一种提取高质量红树植物总RNA的有效方法
陈宏林1,2,王玺1**,何振艳2**
1.沈阳农业大学农学院 沈阳 110161
2.中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室 北京 100093
An Effective Method of High Quality Total RNA Isolation of the Mangrove Plants
CHEN Hong-lin1,2,WANG Xi1,HE Zhen-yan2
1.College of Agronomy, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161, China
2.Key Laboratory of Plant Photosynthesis and Molecular Environmental Physiology, Institute of Botany,Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093, China
 全文: PDF(449 KB)   HTML
摘要：

为了从富含单宁和多糖的红树植物中获得高质量的RNA，在总结及改良前人工作的基础上，优化了提取缓冲液的条件，采用碱性条件、PVP及β-巯基乙醇抑制单宁的氧化；利用RNA与单宁、多糖在不同浓度的2丁氧乙醇中溶解度不同的特性来去除单宁和多糖；同时利用LiCl来选择性沉淀RNA，获纯度较高的RNA可以直接用于cDNA合成、cDNA文库的构建以及RACE 等分子生物学操作。
关键词： 秋茄;  红海榄;  榄李;  红树植物;  单宁;  多糖;  RNA提取    
Abstract:

In order to get high quality RNA from mangrove plants rich in tannins and polysaccharides，based on summing up and improved our predecessors, the conditions of extraction buffer was optimized to inhibit the oxidation of tannins by the conditions of alkaline conditions, PVP and β-mercaptoethanol. Most of the polysaccharjdes and tannins extracted with nucleic acids are removed by taking advantage of differences in solubility of these compounds in the solvent 2-butoxvethano. Moreover, LiCl was used to selectively precipitate RNA and obtained higher purity of the RNA which can used for operation of molecular biology such as cDNA synthesis, cDNA library construction and RACE technique.
Key words: Kadelia candel    Rhizophora stylosa    Lumnitzera racemosa    Mangrove    tannins,    Polysaccharides    RNA isolation
收稿日期: 2010-01-12 出版日期: 2010-06-12
基金资助:

国家“863”计划资助项目（2007AA091704）
通讯作者: 何振艳     E-mail: wangxi-sn2008@tom.com;hezhenyan@ibcas.ac.cn
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陈宏林
王玺
何振艳

引用本文:

陈宏林 王玺 何振艳. 一种提取高质量红树植物总RNA的有效方法[J]. 中国生物工程杂志, 2010, 30(06): 84-88.

chen honglin. An Effective Method of High Quality Total RNA Isolation of the Mangrove Plants. China Biotechnology, 2010, 30(06): 84-88.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Q819    或    https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2010/V30/I06/84

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