hsRAGE-IgG FC融合蛋白的表达及其生物学活性

doi:Q786

中国生物工程杂志

2010, Vol. 30

Issue (06): 44-47 DOI: Q786

研究报告

hsRAGE-IgG FC融合蛋白的表达及其生物学活性

张璟¹,莫桂玲¹,张庆友¹,苏志坚²,许华¹,黄亚东²,郑青^1*

1. 暨南大学药学院广州 510632
2.暨南大学生命与健康工程研究院广州 510632

Expression of hsRAGE-IgG Fc Fusion Protein and Its Bioactivity

ZHANG Jing¹,MO Gui-ling¹,ZHANG Qing-you¹,SU Zhi-jian²,XU Hua¹,HUANG Ya-dong²,ZHENG Qing¹

1.Pharmacy College,Jinan University,Guanzhou 510632,China
2.Institutes of Life and Health Engineering,Jinan University,Guanzhou 510632,China

全文: PDF(475 KB) HTML

摘要：

将编码人可溶性晚期糖基化终产物受体-免疫球蛋白G Fc段（hsRAGE-IgG Fc）融合蛋白的DNA片段克隆到大肠杆菌表达栽体pET-20b中，构建重组表达质粒，转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达。SDS-PAGE分析表明其表达形式为包涵体，相对分子质量约为66kDa，表达量占茵体总蛋白的38.4％。经复性后，获得纯度为96.6％的融合蛋白，得率约为29.5mg／L。经Western印迹法鉴定，该融合蛋白可与sRAGE 抗体产生阳性反应。同时，hsRAGE-IgG Fc 融合蛋白可以显著抑制晚期糖基化终产物（AGE）引起的ECV-304 细胞NF-κB p65 表达的上调，其活性与hsRAGE相似。

关键词： 可溶性晚期糖基化终产物受体; 免疫球蛋白G FC段; 融合蛋白; 表达

Abstract:

The human soluble receptor for advanced glycation end products (hsRAGE) fused with the immunoglobulinin G Fc fragment (IgG Fc) was expressed in Rosetta(DE3) by IPTG induction.The result of SDS-PAGE analysis indicated the hsRAGE-IgG Fc fusion protein was expressed in the form of inclusion body.The expression level of the fusion protein was about 40% of the total cellular protein.After renaturation and purification,a purity of about 96% of the fusion protein was obtained.Result of Western blotting indicates the fusion protein can specifically combine with sRAGE antibody and significantly inhibit the over expression of NF-κB p65 of ECV-304 cells induced by AGEs.

Key words: Soluable receptor for advanced glycation end products(sRAGE) Immunoglobulin Fc (IgG Fc) Fusion protein Expression

收稿日期: 2010-01-08 出版日期: 2010-06-12

通讯作者: 郑青 E-mail: tzhengq@jnu.edu.cn

	服务
	把本文推荐给朋友
	加入引用管理器
	E-mail Alert
	RSS
	作者相关文章
	张璟
	莫桂玲
	张庆友
	苏志坚
	许华
	黄亚东
	郑青

引用本文:

张璟莫桂玲张庆友苏志坚许华黄亚东郑青. hsRAGE-IgG FC融合蛋白的表达及其生物学活性[J]. 中国生物工程杂志, 2010, 30(06): 44-47.

ZHANG Jing, MO Gui-Ling, ZHANG Qiang-You, SU Zhi-Jian, HU Hua, HUANG E-Dong, ZHENG Jing. Expression of hsRAGE-IgG Fc Fusion Protein and Its Bioactivity. China Biotechnology, 2010, 30(06): 44-47.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Q786 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2010/V30/I06/44

［1］ Bierhans A，Humpert P M，Morcos M,et al. Understanding RAGE, the receptor for advanced glycation endproducts. J Mol Med，2005，83:876886.
［2］ Hudson B I，Bucciarelli L G，Wendt T，et al. Blockade of receptor for advanced glycation endproducts: a new target for therapeutic intervention in diabetic complications and inflammatory disorders. Arch Biochem Biophys，2003，419:8088.
［3］ Sakurai S，Yonekura H，Yamamoto Y. The AGE  RAGE system and diabetic nephropathy. J Am Soc Nephrol，2003，14:S259 S263.
［4］ Capon D J，Chamow S M，Mordenti J，et al. Designing CD4 immunoadhesins for AIDS therapy. Nature，1989，337 ( 6207):525531.
［5］ Chamow S M，Ashkenazi A. Immunoadhesins:principles and applications. Trends Biotechnol，1996，14 (2):5260.
［6］ Landolfi N F. Chimeric ligand / immunoglobulin molecules and their uses. US Patent 5, 349, 053. 19940920
［7］ Smith C A，Goodwin R G，Beckmann M P. Tumor necrosis factor  alpha and beta receptors. US Patent .6, 224, 867. 20012005.
［8］赵善超，姜勇，刘靖华等. 人可溶性晚期糖基化终产物受体的原核表达及活性鉴定. 第一军医大学学报，2005，25(7):769773. Zhao S C,Jiang Y,Liu J H,et al.J First Mil Med Univ,2005,25(7):769773.
［9］ Chavakis T，Bierhaus A，Nawroth P P，et al. RAGE (receptor for advanced glycation end products): a central player in the inflammatory response. Microbes Infect. 2004，6 (13): 12191225.
［10］ Basta G，Lazzerini G，Massaro M，et al. Advanced glycation end products activate endothelium through signaltransduction receptor RAGE:a mechanism for amplification of inflammatory responses. Circulation，2002，105(7):816822.
［11］ Bucciarelli L G，Wendt T，Qu W，et al. RAGE blockade stabilizes established atherosclerosis in diabetic apolipoprotein Enull mice. Circulation，2002，106 (22): 28272835.

[1]	贺立恒,张毅,张洁,任豫超,解红娥,唐锐敏,贾小云,武宗信. 基于转录组和WGCNA的甘薯花青素合成相关基因共表达网络的构建及核心基因的挖掘^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(9): 27-36.
[2]	乔圣泰,王曼琦,徐慧妮. 番茄SlTpx原核表达蛋白的体外功能分析^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(8): 25-32.
[3]	李冰,张传波,宋凯,卢文玉. 生物合成稀有人参皂苷的研究进展^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(6): 71-88.
[4]	王惠临,周凯强,朱红雨,王力景,杨仲璠,徐明波,曹荣月. 凝血因子VII及其重组表达新进展[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(2/3): 129-137.
[5]	张磊,唐永凯,李红霞,李建林,徐逾鑫,李迎宾,俞菊华. 促进原核表达蛋白可溶性的研究进展 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(2/3): 138-149.
[6]	刘美琴,高博,焦月盈,李玮,虞结梅,彭向雷,郑妍鹏,付远辉,何金生. 人呼吸道合胞病毒感染的A549细胞中长链非编码RNA表达谱研究[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(2/3): 7-13.
[7]	杨茜,栾雨时. sly-miR399在番茄抗晚疫病中的初步探究^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(11): 23-31.
[8]	陈素芳,夏明印,曾丽艳,安晓琴,田敏芳,彭建. 抗菌肽Cec4a的重组表达和抗菌活性研究^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(10): 12-18.
[9]	石鹏程, 纪晓俊. 酵母系统表达人表皮生长因子研究进展 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(1): 72-79.
[10]	饶海密,梁冬梅,李伟国,乔建军,财音青格乐. 真菌芳香聚酮化合物的合成生物学研究进展^*[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(9): 52-61.
[11]	邓通,周海胜,吴坚平,杨立荣. 基于分子伴侣策略提高NADPH依赖型醇脱氢酶的异源可溶性表达 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(8): 24-32.
[12]	张潇航,李媛媛,贾敏晅,顾奇. 弹性蛋白样生物材料的制备及性质鉴定 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(8): 33-40.
[13]	吕一凡,李更东,薛楠,吕国梁,时邵辉,王春生. **LbCpf1基因的原核表达、纯化与体外切割检测 ^***[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(8): 41-48.
[14]	蒋丹丹,王云龙,李玉林,张怡青. 含RGD修饰的病毒样颗粒递送ICG靶向肿瘤的研究 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(7): 22-29.
[15]	程旭,杨雨睛,吴赛男,侯勤龙,李咏梅,韩慧明. 金黄色葡萄球菌SarA、IcaA及其融合基因的DNA疫苗构建及在小鼠免疫应答中的初步研究 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(7): 41-50.

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed