生物可降解的形状记忆聚合物兼具生物可降解性和形状记忆特性，作为医疗器械植入人体，在完成功能后能够在体液的作用下发生降解，对人体无毒无害，避免了二次手术对病人造成的痛苦以及避免医疗器械长期植入体内存在带来的安全隐患。作为医疗器械植入体，需要具有良好的细胞相容性。实验将D,L-聚乳酸基形状记忆聚合物与人脐静脉内皮细胞在体外复合培养，以考察细胞在材料上的增殖能力。实验中观察了细胞形态(HE染色观察)，采用了铺膜法和浸提液法评价了细胞的增殖能力。结果表明：与对照组聚乳酸相比，铺膜法和浸提液法评价细胞的增殖能力所得结论具有一致性，形状记忆材料在细胞黏附和增殖表现良好。
为研究重组阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的活性，从阴道毛滴虫提取RNA，经过RT-PCR克隆蛋氨酸γ-裂解酶基因，与pET-15b质粒连接构建原核表达载体pET-15b-mgl1，并测序。转化宿主菌BL21后进行诱导表达，分离纯化目的蛋白并研究其酶学性质。以L-蛋氨酸、DL-同型半胱氨酸、L-半胱氨酸为底物测定重组酶Km值为0.318、2.14、1.62mmol/L，比活性分别为20.17、318.69、56.96μmol/min/mg protein。MGL最适pH在5.0到6.0之间，在50℃可稳定30min无活性损失。实验结果显示重组酶具有较高的活性和较好的热稳定性，为临床应用研究奠定基础。
构建表达Tat与人酸性成纤维细胞生长因子（acidic fibroblast growth factor, aFGF）融合蛋白的重组质粒pET3c–Tat-aFGF14-154和pET3c-Tat-aFGF27-154，并转化大肠杆菌BL21（DE3）中。37℃，l mmol/L的IPTG诱导4 hrs后，获得分子量约为18 kDa的融合蛋白，表达量分别占菌体总蛋白的42%和24%。利用阳离子交换（CM-Sepharose FF）、肝素亲和层析（Heparin-Sepharose CL-6B）以及分子筛（Sephadex G-25）联用的方法可获得纯度大于95%的目的蛋白，得率分别为93和78 mg/L。Tat-aFGF14-154及其对照蛋白aFGF14-154对Balb/c 3T3细胞有明显促细胞增殖的作用，最佳作用浓度分别为1280 ng/ml和160 ng/ml。而Tat-aFGF27-154 及其对照蛋白aFGF27-154则几乎没有促细胞增殖活性。免疫荧光分析结果表明，Tat-aFGF14-154及Tat-aFGF27-154均能穿过PC12、Balbc/3T3、HaCaT和海马神经元细胞的细胞膜，并主要定位于细胞浆中。此外，四种重组蛋白均能降低Aβ25-35对大鼠海马神经元细胞的毒性，在剂量为1000 ng/ml时，Tat-aFGF14-154、Tat-aFGF27-154、aFGF14-154及aFGF27-154细胞存活率分别为90.66%、81.87%、85.71%和78.02%，而Aβ25-35模型组的存活率仅为56.87%。
噬菌体抗体库技术是获得治疗性抗体的一条重要途径。以20份健康人外周血为样本，通过提取淋巴细胞、逆转录－PCR（RTPCR）、抗体可变区基因的扩增、重叠PCR获得单链抗体（ScFv）基因，将ScFv克隆入噬粒载体，通过近300次的电转化获得了库容量为1.3×109的全人源天然ScFv噬菌体抗体库。通过随机挑克隆测序和用5种不同抗原筛选对抗体库进行了初步验证。随机测序表明抗体库具有较好的多样性，用5种不同抗原对其进行筛选，均获得了特异性噬菌体抗体的不同富集，表明成功构建了一个多样性良好的人源天然ScFv噬菌体抗体库。
鸡的胚胎已经成为发育生物学、免疫学和癌症等学科的重要实验模型之一。以鸡胚胎为实验模型，以鸡myostatin为靶基因，利用逆转录病毒介导和原位杂交技术相结合的方法来研究目的基因的鸡胚胎转导和检测分析。实验结果表明：逆转录病毒介导的目的基因myostatin能够有效整合到胚胎基因组中，且具有转录活性；胚胎原位杂交检测能够准确直观的反映病毒的整合部位和转入基因的表达水平。不但为进一步研究鸡myostatin基因在胚胎发育中的功能奠定基础，同时在方法上也进行了简单的优化尝试。
目的：从变形链球菌基因组中筛选反应调控蛋白ComE结合的核酸序列。方法：⑴提取变形链球菌UA159 基因组，进行超声剪切处理。以基因组片段为模板，用随机引物进行延伸，切胶纯化和PCR 扩增后获得基因组文库。⑵应用基因组 SELEX 技术，以ComE 蛋白为靶物质，与变形链球菌基因组文库共同孵育，循环筛选8轮。筛选产物TA克隆后送去测序，测序结果进行生物信息学分析。⑶将分析得到的2个序列分别克隆入pFW5-luc载体中，然后分别重组到变形链球菌UA159野生株和comE突变株的基因组中，采用RT-PCR的方法检测luc片段的表达。结果：⑴获得了变形链球菌UA159 的基因组文库，片段范围约为100～300bp。⑵随机挑取54个克隆送去测序，经生物信息学分析和RT-PCR初步验证，最终获得1个ComE 蛋白可能的结合序列。结论：采用基因组 SELEX 技术，筛选反应调控蛋白ComE可能的结合序列，并进行了初步验证，为后续进行变形链球菌反应调控蛋白ComE调控机制的研究奠定了基础。
目的:构建含有日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白(SjFABP)，3-磷酸甘油醛脱氢酶(SjGAPDH)，26kDa谷胱甘肽S转移酶(Sj26)的三价DNA疫苗，并通过药理实验评价其抗血吸虫感染的免疫保护作用。 方法: 以血吸虫成虫RNA为模板制备cDNA第一链，RT-PCR扩增得到抗原基因片段，再通过重组PCR技术，将Sj26和SjGAPDH融合为Sj26.SjGAPDH基因。将SjFABP和Sj26.SjGAPDH分别克隆入pVIVO2的mcs1和mcs2，获得重组质粒pVIVO2-SjFABP/Sj26.SjGAPDH。瞬时转染MCF-7细胞，通过逆转录PCR（RT-PCR）检测抗原基因在mRNA水平的表达，通过间接荧光免疫（IIF）检测抗原基因在小鼠体内抗原水平表达，验证了DNA疫苗的有效性；并免疫小鼠后进行免疫保护性初步试验。结果: 经过酶切、测序及体内外表达验证，该三价DNA疫苗pVIVO2-SjFABP/Sj26.SjGAPDH构建成功；该三价DNA疫苗在小鼠抗血吸虫感染中诱发减虫率和减卵率达到58.6%和59.8%。结论: 该三价DNA疫苗组具有比单价和双价DNA疫苗组更加良好的免疫保护作用，为日本血吸虫DNA疫苗的研制奠定了基础。
采用自行设计的MHC I类A型基因的引物从10只食蟹猴扩增得到11个3 000bp左右MHC等位基因。通过在Blast比对之后，证实有7个Mafa-A等位基因，4个Mafa-AG等位基因，新的等位基因序列已递交GenBank。由于每个个体可以检测出多个不同的Mafa-A等位基因，这说明食蟹猴Mafa-A基因经过多次复制，并且推测Mafa-AG是Mafa-A衍生物。同时，研究了等位基因在个体中的分布和系统进化树分析。
镉是一种毒性很大的重金属。土壤溶液中即使存在极低浓度Cd2+也能对植物造成伤害。早在植物做出结构和代谢的调整以适应逆境之前，由于Cd2+的刺激，植物的基因表达已经发生了变化。这里我们采用一种新的基于引物退火控制技术的差异显示方法来筛选受镉离子诱导表达的基因。获得的19条差异条带代表着18个基因。经过RT-PCR方法验证，其中6个基因确实是受Cd2+诱导表达，包括LEA(胚胎发育晚期丰富蛋白), AtGSTF2(谷胱甘肽-S-转移酶2), AtGSTF6(谷胱甘肽-S-转移酶6), HSP70(热激蛋白70), sHSP17.6B-CI(17.6 kDa 类型 I小分子热激蛋白)和sHSP17.6-CII(17.6 kDa类型II 小分子热激蛋白)。 这些结果有助于研究植物对镉离子胁迫的解毒机制。其中的三个热激蛋白基因的启动子也能考虑用于植物修复。
PpMADS1基因属于一类MADS box 基因，在植物的花发育调控中起着重要的作用。通过Genome Walking的方法从桃基因组中分离了长度为1 814bp的PpMADS1基因启动子片段，序列分析表明，在此启动子上不仅含有TATA box 和CAAT box基本元件，而且含有大量的与光调节有关的调控元件，如GT-1，Sp1和as-2-box，另外存在两个CArG-box元件、一个G-box元件和一个TGA-element，说明该启动子可能受光周期和激素的调控。将该启动子通过5′端缺失，分区段与GUS报告基因连接构建表达载体，并转化拟南芥。GUS组织化学染色分析结果表明，在-197到-454bp有促使GUS在花原基中表达的花原基特异性元件，在-454到-678bp之间存在促使GUS在萼片和花瓣表达的特异性元件，在-678到-978bp存在负调控作用元件，阻遏了GUS基因在花药中的表达。
RT-PCR从玉米幼叶总RNA中克隆f型和m型硫氧还蛋白（Thioredoxin, Trx）的编码基因，分别将两种类型Trx活性中心的第二个保守Cys残基定点突变成Ser残基和Ala残基。在大肠杆菌分别重组表达和纯化了含组氨酸标签的Trx及其突变体蛋白，SDS-PAGE显示纯化的蛋白显示一条主带，蛋白分子量分别估计为f型Trx为18kDa，m型Trx为14kDa；纯化的含有SUMO标签融合Trx，用SUMO专一性SUMO水解酶Ulp除去SUMO，等点聚焦电泳显示m型和f型Trx的等电点分别为4.6和5.9。m型Trx比f型Trx有更强的还原胰岛素能力，而突变体蛋白几乎没有还原能力。用Cys残基专一性标记化合物AMS标记Trx，显示野生型Trx有氧化还原态，而突变体蛋白仅有还原态。SDS-PAGE电泳显示固定化的f型Trx突变体比m型Trx突变体捕获的玉米幼叶靶蛋白更具有多样性。
产生物柴油微藻大规模培养对微藻藻种的性能要求较高。从丰富的藻种资源中筛选到高品质的藻种一直是个亟待解决的问题。通过研究3株产油微藻，从系统工程的角度综合整个微藻生物柴油的技术工艺，建立了以生长速率、含油率、油脂组成等18种指标的二级评价体系，采用二级模糊综合评价的模糊数学方法对产生物柴油微藻的性能进行综和分析、筛选。最终确定供评价的三株微藻二级模糊综合评价集：小球藻LICME001［0.360 0.315 0.192 0.069 0.064］，微绿球藻LICME002［0.277 0.331 0.236 0.104 0.052］和葡萄藻LICME003［0.325 0.371 0.232 0.071 0.060］。根据最大隶属度法则分析得：小球藻LICM001株产生物柴油微藻品质为优等级别，适合产生物柴油的技术工艺要求；微绿球藻LICME002和葡萄藻LICME003为良等级别的产生物柴油藻种。
从浙江某污水处理厂的活性污泥中筛选出若干株在高pH条件下对偶氮染料酸性大红GR有脱色能力的菌株，经脱色验证得到一株具有高效脱色活性的菌株Z1，经鉴定为巴斯德葡萄球菌(Staphylococcus pasteuri)，并对此菌株的脱色特性进行了初步研究。结果表明，在厌氧条件下，Z1在pH7~12，40h对50mg/L的酸性大红GR脱色率均可达90%以上。该菌株对染料有较强的耐受力，在酸性大红GR浓度为300mg/L时，48h的脱色率仍可达93%。此外，该菌株能够对多种偶氮染料脱色，具有较好的脱色广谱性，有望应用于处理工业废水中的偶氮染料。
目的: 利用荧光测钙的方法，建立了人源代谢型谷氨酸受体5亚型(mGluR5)的高通量筛选模型。方法: 通过基因合成得到mGluR5的ORF区域，并将其构建到pCNDA3.1真核表达载体上。将此重组质粒转染HEK293细胞，利用抗生素筛选和钙流检测方法得到稳定表达mGluR5的重组细胞株。结果: 对试验条件:接种密度,孵育时间,溶剂DMSO浓度进行了优化，建立了稳定可靠的实验系统。并使用该受体特异激动剂和拮抗剂进行了功能验证,其中激动剂EC50 L-Quisqualic acid(67.8nmol/L) > L-Glu(2.73μmol/L)，抑制剂IC50 MTEP(3.3nmol/L) > Fenobam(23.5nmol/L)系统Z因子为0.68,证明建立了一个人源mGluR5抑制剂的细胞筛选模型。利用此重组细胞株对360种化合物进行了筛选，找到了若干对mGluR5有抑制效果的化合物。结论: 此细胞模型适用于mGluR5抑制剂的高通量筛选。
目的：建立表达乙肝病毒受体人ASGPR的转基因小鼠。方法：克隆人的脱唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）两个亚基的cDNA，连入PCAGGS构建转基因表达载体，以显微共注射的方法将两种各3.9kb的转基因片段引入小鼠的受精卵。采用PCR、Southern印迹、RT-PCR、Western印迹的方法对转基因小鼠进行鉴定。结果与结论：获得了在小鼠肝脏组织中共表达有乙肝病毒（HBV）受体ASGPR H1和ASGPR H2的一个转基因小鼠系，可为HBV的研究提供一种良好的感染动物模型。
采用高效液相色谱法测定重组人干扰素α1b粉雾剂的含量及均匀度。结果表明溶液中重组人干扰素α1b浓度在92.50~462.50μg/ml时峰面积（Y）与相应浓度（X）呈线性关系，（r=0.999 9）。并且在成品的含量测定时，重组人干扰素α1b的色谱峰峰形良好，杂质与流动相无干扰。本方法精密度、准确度高，稳定性良好，能够准确、迅速的测定重组人干扰素α1b粉雾剂成品中的主药含量及均匀度。
构建家蚕Bombyx mori肌动蛋白（BmA3）启动子驱动的家蚕核型多角体病毒（BmNPV）多角体基因（ph）和OpNPV极早期启动子（IE1）驱动的zeocin抗性筛选基因转座供体载体，与鳞翅目辅助转座质粒pie2piggyBac共转染家蚕卵巢细胞BmN，经200μg/ml zeocin抗生素筛选一个月，成功获得持续表达BmNPV多角体蛋白的稳定细胞系BmN-A3ph。多角体缺陷型重组病毒BmBac-GF P感染拯救细胞系BmN- A3ph, 细胞成功装配出病毒包涵体颗粒，其包装效率约为野生型病毒感染正常BmN细胞的8%。用拯救型包涵体病毒颗粒喂食家蚕幼虫进行复感染，结果表明稳定细胞系所包装的包涵体病毒与野生型病毒一样能够通过口服途径感染宿主，却并不在宿主体内形成包涵体，从而保证外源基因高效表达。拯救型包涵体病毒可望解决传统注射感染效率较低问题，通过喂食感染可促进杆状病毒介导的家蚕生物反应器产业化进程。
以中国林蛙卵为原料，采用丙酮分级沉淀、SP-Trisacryl阳离子交换色谱、Sephadex G-75凝胶过滤色谱、C8反相色谱等纯化方法，得到一种具有核糖核酸酶活性的蛋白质,采用SDS-PAGE电泳对该蛋白质进行了相对分子质量和纯度测定。结果表明：纯化的中国林蛙卵核糖核酸酶为相对分子质量13kDa的单一成分。该酶最适反应温度为65℃，最适反应pH为5.5~6.0，米氏常数为4.11μmol/L，最大反应速率为2.82 pmol/s。在体外细胞毒性实验中，对人三种肿瘤细胞HeLa、K562、MCF-7具有抑制作用，其IC50分别为0.6μmol/L、0.8μmol/L和4μmol/L，而对于正常人成纤维细胞在酶浓度达到8μmol/L时仍未见明显细胞毒性。这种从中国林蛙卵中分离纯化出的具有选择性细胞毒性的小分子量核糖核酸酶，为肿瘤的治疗提供了新的候选蛋白分子。
水痘-带状疱疹病毒（VZV）属于疱疹病毒科α亚科，其原发感染为水痘，潜伏再度激活则引起带状疱疹。目前对其基因功能和疫苗的减毒机制尚不十分清楚。细菌人工染色(BAC)是一种新的用于大分子DNA克隆的载体系统，它具有容量大、遗传稳定、操作简单等优点。将VZV全基因组克隆至BAC系统构建成VZV的感染性克隆，并利用现代基因修饰技术可极大促进对该病毒的研究。就近年来以BAC为基础VZV感染性克隆技术的建立和应用做一综述。
新血管生成是各种生理和病理过程发生的基础。在胚胎形成和胎盘发育等正常生理过程中，新血管的生成是至关重要的；然而对于一些疾病的产生，特别是肿瘤的生长、进展和转移，同样离不开血管生成的作用。伴随着“抗肿瘤血管生成疗法”的提出，控制血管生成“开关”的血管生成刺激因子和抑制因子成为研究的热点。Arresten、Canstatin、Tumstatin和Hexastatin是近些年发现的内源性的血管生成抑制因子，它们同系Ⅳ型胶原α链的非胶原区NC1，具有相似的结构和分子量大小，现有研究表明，它们能与内皮细胞表面整合素受体相结合，有效地抑制内皮细胞的增殖和迁移，降低肿瘤组织的微血管密度，切断肿瘤的营养和氧气供给，从而抑制肿瘤的生长和转移。对其作用机制的研究，将有助于肿瘤血管生成抑制剂新药的研发。
类弹性蛋白多肽是一种人造基因工程蛋白质聚合物，其结构主要由五肽重复串连序列单元 (GVGXP) 的这一肽段单元重复组成。由于具有可逆相变特征，并可进行高通量生产，加之良好的生物相容性及生物可降解性，使其在新型生物医学材料方面展示了广阔的应用前景。概括了类弹性蛋白多肽的相变机理、合成方法及在生物医学材料上的应用，重点阐述了类弹性蛋白多肽在组织工程、靶向肿瘤、构造药物载体微粒的应用。
甲酸脱氢酶（FDH）是植物中普遍存在的一种含量丰富的酶。甲酸脱氢酶也是一种NAD依赖的酶，它催化甲酸氧化成二氧化碳的可逆反应。植物FDH是植物一碳代谢的一部分，它在植物响应各种环境胁迫、低氧或缺氧过程中发挥着重要的作用，因此在农学生产上具有很大的应用潜力。最近植物来源的FDH基因克隆和表达调控及其生理学功能等各方面的研究都取得很多重要的进展。综述了近年来植物来源的FDH基因克隆和表达调控及其生理学功能方面的研究进展。
甘油是酵母细胞生长代谢过程中常见的多元醇物质。尽管甘油的结构简单，代谢途径并不复杂，但是其在细胞内的生理功能十分重要。甘油代谢过程主要参与细胞的高渗透压生理调节和厌氧条件下的胞内氧化还原平衡调节。近年来许多学者在酵母细胞的甘油代谢及生理功能方面开展了深入的研究。在扼要介绍甘油生理代谢的基础上，重点阐述甘油代谢参与细胞高渗压甘油应答信号途径和氧化还原平衡调节的生理机制，同时就酵母细胞甘油合成的代谢工程进行归纳和评述。
加拿大生物技术产业发展迅速，已成为该国第二大高技术产业，生物技术公司数目、从业人数居世界第2位，主要聚集于魁北克、安大略、卑诗省三省，其中生物医药、生物农业、生物能源、纳米技术是其优势领域。加拿大政府通过制订生物技术策略、完善管理体制、提高公立科研机构研究水平、加强宏观指导和政策性调控、强化风险投资等措施保障生物科学和产业的发展。
