德国是欧洲第一经济大国，对生物科技一贯十分重视，希望生物技术产业成为继汽车、机械制造之后的第三大产业。促进基础研究和产业化开发；注重发挥自身的优势抢占生命科学前沿制高点；实施一系列科技计划全方位推进生物科技创新；着力后备人才培养；依托区域优势和凸显区域特色，多层面促进生物技术产业发展；政府十分重视工业生物技术的发展，大力扶持创新型生物技术企业。
新西兰生物产业的规模并不十分引人注目，但却是新西兰经济中不可忽视的组成部分，其生物科技方面的优势领域主要是农业生物技术和生物医学两方面，例如大型动植物、生物安全、环境保护、神经科学、心血管疾病、结核与哮喘、糖尿病和癌症等研究领域。新西兰政府十分重视生物科技和产业的发展，在其2002年颁布的《创新增长框架》计划中，将生物技术列为未来的三大经济增长支柱之一，将加大对生物科技和产业的投入作为新西兰向高技术经济转型的重要举措。
非洲是世界上生物科技最不发达的地区，现代生物科技在许多非洲国家还是新鲜事物。但近年来，非洲国家对生物科技的发展充分重视，不断加强生物人才培养，积极开展国际合作，高度重视生物安全，参与各种UNEP/GEF生物安全计划，并在非盟组织以及国际机构的引导和支持下，成立了生物科技高水平专家组（ABP）,撰写了“非洲生物技术发展报告”提出非洲生物技术发展构想。了解和研究非洲生物科技发展现状及动态对我国生物科技的发展以及开展中非合作有着重要的意义。
表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor，EGFR)属受体酪氨酸激酶(Tyrosine kinase，TK)家族，其胞内的酪氨酸激酶在细胞信号转导通路中具有十分重要的作用。许多肿瘤的发生、发展都与EGFR胞内酪氨酸激酶的异常表达密切相关。因此，EGFR胞内酪氨酸激酶的抑制剂有可能成为治疗肿瘤的有效药物。本研究从人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 提取总RNA，采用RT-PCR获得EGFR酪氨酸激酶催化域的编码基因。将其克隆至载体pET-30a，在E.coli BL21(DE3)中进行了成功表达，采用Ni-NTA亲和层析对其进行了纯化。通过对酶的活性的测定，证明重组EGFR酪氨酸激酶蛋白具有利用ATP催化底物发生磷酸化反应的激酶活性。以该重组激酶为靶位构建了酶抑制剂筛选模型，拟对微生物代谢产物进行筛选。
利用RT-PCR法，从人胰腺组织扩增出SNAP25基因，定向克隆至pENTR-TOPO载体获得重组质粒pENTR/D-TOPO-SNAP25。经PCR及测序验证其阅读框正确。再与腺病毒载体pAD／CMV／V5一DEST 发生LR重组反应，SNAP25取代pAD／CMV／V5一DESTTM中的ccdB-CmR基因，获得重组腺病毒载体pAD／CMV／V5一DEST-SNAP25(pAD- SNAP25)。重组腺病毒载体经Pac I酶切，脂质体法转染HEK-293A细胞．以鼠抗人SNAP25单克隆抗体为一抗，做荧光及Western Blot检测，结果表明重组腺病毒pAD-SNAP25在HEK-293A细胞中包装成功。重组腺病毒pAD-SNAP25感染大鼠胰岛，结果表明在高糖浓度下，外源性SNAP25蛋白的表达促进了大鼠胰岛素分泌。
目的：在大肠杆菌中重组表达Ⅱ型志贺样毒素B亚单位（Stx2B），并对其表达形式和受体结合活性进行分析。 方法：PCR方法从肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157:H7中钓取Stx2B编码基因，利用基因克隆技术构建重组大肠杆菌pET-stx2B/BL21，IPTG诱导目的蛋白高效表达并对表达的包涵体进行变性和复性处理，离子交换层析纯化蛋白。通过SDS-PAGE变性和非变形蛋白电泳，分析重组Stx2B的表达形式，并利用Hela细胞结合模型，评价重组Stx2B与细胞受体的结合活性。结果：构建的重组大肠杆菌pET-stx2B/BL21能高效表达Stx2B，经变性、复性及离子交换层析操作，获得高纯度的目的蛋白。SDS-PAGE变性和非变形蛋白电泳分析显示，重组Stx2B以二聚体形式存在，单体之间通过二硫键相连。细胞结合试验显示，重组Stx2B与Hela细胞具有特异结合活性。结论：成功构建表达Stx2B的基因工程菌，Stx2B的受体结合活性不依赖于五聚体形式。
将来源于采采蝇的TTI基因序列改造成大肠杆菌偏爱密码子，利用重组PCR方法获得TTI目的基因片段，在大肠杆菌中得到高效表达。经纯化获得了纯度高于98%的融合蛋白，建立了酶活测定方法。实验证明融合蛋白具有抑制凝血酶的活性。当凝血酶浓度为10U/ml，纯化的融合TTI体积为10 l，底物浓度为250 mol/L，融合蛋白对凝血酶的抑制率为73%，确定反应类型为竞争性抑制，Ki为35 mol/L。
利用大肠杆菌菌株表达出高纯度的酸性成纤维细胞生长因子，并对其促3T3细胞的增殖作用和对实验秃毛大鼠的疗效进行了研究。结果表明，在体外实验中，1.95 ng/ml~1000ng/ml的aFGF溶液可以促进balb/c 3T3细胞的分裂增殖，与PBS组比较具有显著性差异(P<0.05，P<0.01)；在体内实验中，在第7天，4μg/ml aFGF组大鼠毛发长度变长，与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)；在第14天，2μg/ml 和4μg/ml aFGF组大鼠毛发长度继续变长，与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)。病理检查结果显示aFGF可以促进实验秃毛大鼠的毛囊数目增多，毛囊无萎缩变小现象，血管无充血现象，基本恢复到正常水平。由此得出aFGF可以促进3T3细胞的分裂增殖，以及促进实验秃毛大鼠的毛发生长。aFGF具有很好的开发前景。
HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病。酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的“金标准”。因此本实验构建gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达, 为HIV抗体测定提供特异、价廉的抗原。选定HIV-1 gp160基因中三个片段包含较多抗原表位的区域, 设计带有酶切位点的引物，用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这三个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性， SDS-PAGE和Western Blot测定融合蛋白的抗原特异性。构建的HIV-1 gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒，酶切和测序结果表明基因序列正确，基因全长969bp。在大肠杆菌BL21(DE3) 中高效表达的重组蛋白分子量为37kDa，以包涵体的形式存在。应用western blot测定10例正常人和12例HIV/AIDS病人血浆显示HIV-1 gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性。成功构建了高表达 HIV-1 gp160多表位蛋白的原核表达系统，纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性。
研究分泌表达16拷贝牛肉风味肽（beefy meaty peptide, BMP）毕赤酵母工程菌株(Pichia pastoris GS115-16B2)的500L发酵罐中试发酵工艺。在500L发酵罐中采用三步发酵法进行了3批次中试发酵实验，设定菌体培养阶段温度为30℃，pH5.0，诱导表达阶段温度为28℃，pH3.0。在发酵程中通过调节搅拌速度、通气量和罐压等措施来使DO维持在20%~35%左右，总共发酵126h（诱导时间为96h），当诱导88h后（发酵118h），600nm波长下的光密度值(OD600)达到184.5，菌体湿重达到318.7g/L，目的产物BMP的表达量达到最高为172 mg/L，实现了BMP的高效表达。通过中试发酵初步建立了工程菌P. pastoris GS115-16B2的中试发酵工艺，为BMP的进一步研究开发奠定了良好基础。
研究了克雷伯肺炎杆菌（Klebsiella pneumoniae）批式流加发酵生产1，3-丙二醇的发酵工艺，根据1，3-丙二醇的生产和菌体生长相关的特点，采用营养基质限制性流加的发酵工艺，通过控制氮源氯化铵以保持细胞稳定生长。结果表明：过低的氮源浓度，细胞生长受到限制，影响产物1,3-PD的合成；过高的氮源浓度，细胞比生长速率增加，但1,3-PD关于消耗甘油的得率降低，用于生长和维持代谢所消耗的甘油量增加。以0.41 g/(L·h)的氮源流加速率，残余氯化铵浓度在0.1 g/L时，转化率和生产强度最高。发酵25 h～28 h后，1，3-丙二醇最终浓度达到52.03 g/L，生产强度为2.04 g/(L·h)，相对于甘油的摩尔转化率为0.66，分别比氮源限制前提高了28.0 ％、35.1 ％及29.4 ％。通过限制性流加氯化铵，控制细胞的比生长速率，使底物甘油有效转变为发酵的目标产物1,3-PD，有效实现产物1,3-PD的高生产强度以及对甘油的高转化率。
5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶（5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase, EPSPS）是植物和微生物体内合成芳香族氨基酸所必需的一个关键酶，但此酶受广谱性除草剂草甘膦的强烈抑制。本试验对草甘膦胁迫下的棉花品系（Y18）研究发现：棉花品系Y18具有两个不同的5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶基因epsps1和epsps2，两个基因的编码区与其他植物的epsps基因具有较高的同源性，在草甘膦胁迫作用下，棉花的epsps1基因表达较为稳定，epsps2基因表达提高了1.85-2.3倍，初步认为epsps基因表达量的提高是生物对胁迫作用的一种应激反应。
本文应用正交设计对杜仲细胞悬浮培养的基本培养基和植物生长物质浓度进行了筛选，并对影响杜仲细胞悬浮培养和总黄酮含量的不同因素进行了考察。结果表明，B5培养基+0.5mg/L NAA+0.6mg/L 6-BA、蔗糖30g/L、初始pH 5.0-5.5、接种量20g(FW)/L以及摇床转速110r/min为杜仲细胞悬浮培养的适宜条件。通过对杜仲悬浮细胞生长和代谢动力学的分析表明：杜仲细胞悬浮培养生长符合Logistic生长模型，最大比生长速率( m)为0.417d-1；细胞基于蔗糖的真正比生长得率(YG)与维持系数(m)分别为0.619g/g和0.0206g/(g·d-1)；黄酮合成属部分生长耦联型，可用Luedeking-Piret模型进行描述。研究结果为杜仲细胞大规模悬浮培养生产天然活性成分奠定了基础。
以超临界二氧化碳（SCCO2）为分散介质在聚偏氟乙烯（PVDF）微孔膜表面和孔内进行马来酸酐和苯乙烯的接枝共聚，合成出超高分子量的苯乙烯/马来酸酐交替共聚物（SMA）基微孔PVDF膜。以SMA基PVDF膜为载体通过酸酐基和酶分子上的氨基偶联，制备出具有酶催活性的功能性分离膜。考察了影响酶固定化的因素，确定其最佳固定化条件为: 温度，4oC；pH,8.2; 酶/膜,1:10;反应时间，6h。固定化酶膜的最适温度为55oC，最适pH为7.8，均比自由酶稍高；Km（0.3mM/L）与自由酶接近。固定化酶膜活力达13.5 U/cm2 膜, 比活为280.0 U/mg 蛋白，蛋白载量为68.2 g/cm2 膜，相对活力为89.0%。固定化酶膜表现出良好的操作稳定性和储存稳定性，SMA基PVDF微孔酶膜超滤制备低乳糖牛奶实验表明该技术应用前景广阔。
研究了洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia) PCL-3发酵产碱性脂肪酶培养条件的优化。采用单因子试验筛选出糊精为最适碳源，蛋白胨和尿素为复合氮源。通过Plackett-Burman设计试验，对影响产酶条件的8个相关因子进行评估并筛选出具有显著效应的三个因子：尿素、接种量以及初始pH值。用最陡爬坡实验逼近显著因子的最大响应区域后，采用响应面分析法，确定尿素、接种量以及初始pH值最优值分别为0.15％，3.05%和8.59。优化后液体发酵培养基中脂肪酶活力提高到48.88 U/mL，比初始酶活25.37U/ml提高了1.93倍。10 L 的发酵罐中，脂肪酶活力在52h达到最大，为47.69U/mL。
利用PCR技术以Pseudomonas sp. B3-1基因组DNA为模板，扩增出2.9kb编码苯甲酸双加氧酶基因簇benABC。将该基因簇连接于pLAFRJ载体，电转化至E．coli DH5α，再通过三亲本结合法导入野生菌株Pseudomonas sp. B3-1中，得到了一株邻苯二酚产量提高的基因工程菌，命名为Pseudomonas sp.B4。发酵条件优化表明，当苯甲酸钠浓度为6.0 g/L，聚蛋白胨浓度为2.0 g/L，温度为32℃以及pH值为6.0时，工程菌在200rpm旋转摇床发酵36小时后，邻苯二酚产量达到0.7 mg/ml，比优化前提高了20％。
基因重组技术生产蛋白药物较传统提取生产方式具有诸多优点。本文运用一步离子交换色谱层析（Sepharose Fast Flow）和反相(C4)色谱层析串联纯化了CHO 工程细胞株分泌表达的重组人β 神经生长因子（β-rhNGF），纯化产物经SDS-PAGE及反相HPLC 分析纯度均达到 95% 以上，生物学活性经 PC12 细胞和鸡胚背根神经节测定均与 Sigma 标准品无差异。产物经两步纯化后的收率达70% 以上，为建立该产品切实可行的工业化纯化工艺提供了依据。
以海滨锦葵油为原料制备生物柴油。通过单因素试验及正交试验研究了反应温度、催化剂用量、醇油摩尔比、反应时间、搅拌强度等因素对酯交换率的影响。结果表明，在试验范围内各影响因素对酯交换率作用的大小依次为：搅拌强度＞催化剂用量＞醇油摩尔比＞反应时间＞反应温度。海滨锦葵油制备生物柴油的最佳工艺参数为：搅拌强度为1800r.min-1，催化剂KOH用量为海滨锦葵油质量的1%，醇油摩尔比6/1，反应时间60min，反应温度65℃，在该工艺条件下，酯交换反应三次，酯交换率达到97.8%。
目的 根据构巢曲霉（Aspergillus nidulans）3-磷酸甘油醛脱氢酶（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）基因特异位点设计并合成Taqman探针及引物，建立构巢曲霉实时荧光 PCR检测方法。方法 应用lasergene7.1软件对构巢曲霉与13种常见曲霉主要包括黑曲霉（A.niger）、烟曲霉（A.fumigatus）、杂色曲霉（A.versicolor）、土曲霉（A.terrus）、黄曲霉（A. flavus）、温特曲霉（A.wentii）、寄生曲霉（A. parasiticus）、泡盛曲霉（A.awamori）、米曲霉（A. oryzae ）、棒曲霉（A.cavatus）、赤曲霉（A.ruber ）、亮白曲霉（A.ochraceus）及赭曲霉（A.ochraceus）GAPDH基因序列比对分析，在特异位点设计引物和探针，建立构巢曲霉实时荧光 PCR检测方法，并对该方法进行特异性及敏感性分析。结果 用曲霉属22种41株不同曲霉及其他属的12株病原真菌验证实验表明，所建立的荧光PCR方法特异性强；检测灵敏度可达4.03×10－12μg/ml的模板DNA。 结论 应用实时荧光PCR技术能够有效检测构巢曲霉，该方法具有特异、灵敏、快速等特点，可在实际工作中应用。
本研究首次发现冬虫夏草发酵菌丝体含有较高活力的γ-谷氨酰转肽酶（简称CSGT），并且通过硫酸铵分级沉淀、疏水层析、凝胶过滤层析、阴离子交换层析和制备电泳的提取纯化程序，将CSGT纯化了2300倍，然后对CSGT的基本酶学性质进行了研究。CSGT的稳定pH范围和温度范围分别为pH8-11和0-20℃, 当pH 9-10 、30℃并且以L-谷氨酸-对-硝基苯胺（简称GpNA）和双甘肽为底物时CSGT的活力达到最大值。几种还原剂均能激活CSGT，说明其活性中心含有巯基。Zn2+, Cu2+, Hg2+ , Mn2+ 等金属离子均强烈抑制CSGT活性，而K+, Ca2+, Mg2+ 和Na+等对CSGT活性没有影响。
本实验以人参芽胞、二年生人参根、实生苗的茎、叶为外植体研究了体细胞胚的发生条件，并对其发生过程中可溶性蛋白、相关酶活性及内源激素的变化等进行了研究。结果表明，诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 4.0mg/L + BA 0.2mg/L；在MS+2,4-D 1.0mg/L + KT 0.2 mg/L培养基上继代培养，可获得胚性愈伤组织；在无2,4-D的培养基上可诱导出胚状体。将胚状体转入无任何激素的MS培养基上继续培养，之后转入1/2MS培养基上获得再生植株。组织细胞学观察表明人参胚状体的起源方式为单细胞起源。在体细胞胚胎发生过程中，多糖和淀粉含量在早期胚时较低，可溶性蛋白含量、POD及PPO活性在早期胚时最高；IAA在早期胚时期含量最高，在成熟胚时期ABA含量最高，而ABA/IAA比值在成熟胚时较高，利于体细胞胚的发育成熟。cDNA-AFLP 分析表明胚状体发育不同时期的人参培养物基因表达不同,从而导致了分化和发育。培养物HPLC分析表明胚胎发生试管苗总皂苷含量比子叶胚时期高4倍多。单体皂苷差异较大。
环糊精由于自身的生物相容性和结构易裁剪性，通过结构修饰、聚合或超分子组合等设计被逐渐应用于非病毒基因载体系统。本文将分别从环糊精、其小分子衍生物、含环糊精聚合物以及超分子结构综述国内外近几年的设计思路和研究进展，并探讨含环糊精及其衍生物的非病毒基因载体的"结构-安全性-基因转染效率"关系。
小RNA的发现为基因调控系统研究提供了新的方向。在多数物种中已经发现了大量的小RNA。这一领域已经成为了近来研究的热点，在研究起始阶段，计算学方法已经成为实验研究中不可或缺的工具，许多发现是由生物学实验与计算学方法共同合作来完成的。在这篇综述中，我们总结了前人关于小RNA及其靶基因识别的理论知识。最后，讨论了关于预测小RNA及其靶基因的计算学方法和相关软件。
人参皂苷是人参的主要有效成分之一，属典型的萜类化合物。本文对萜类生物合成途径及HMG-CoA还原酶进行了综述。人参皂苷等萜类生物合成分为甲羟戊酸和丙酮酸两种途径，两者都是以异戊烯基焦磷酸为主要的中间产物。大量研究资料表明HMG-CoA还原酶是甲羟戊酸途径的第一个限速关键酶，这对人参皂苷生物合成途径及其调控的深入研究具有一定的参考价值。
生物柴油作为一种可再生的清洁能源，以其良好的环境效应受到越来越多的关注。酶法生产生物柴油具有化学催化法不可比拟的优越性，是工业化生产的发展方向。本文综述了利用固定化脂肪酶、游离酶、全细胞生物催化剂制备生物柴油的研究与应用进展，并探讨了我国生物柴油产业化发展的困境和对策。
自1997年FDA批准第一个治疗淋巴癌的嵌合单抗药物Rituxan, Anti-CD-20抗体上市，并进入56个国家，至2007年，FDA已批准了20多种治疗性单抗药物，约一半用于治疗癌症，七个已成为年销售额超十亿美元的"炸弹药物"。而随着高细胞密度培养及表达技术：大规模培养的表达水平从1g/L到5g/L；细胞的培养规模越来越大：12000L到15000L和在建的20000L细胞培养规模，同时多个细胞培养罐并行运行；这些都极大的推动了大规模蛋白质纯化技术的发展：从批产几公斤－年产几十公斤抗体，发展到批生产几十公斤－年产上十吨抗体的规模。同时，新型凝胶技术、更大规模的纯化生产系统技术和膜过滤技术的发展，使经典的三步层析技术能够缩短到两步层析技术生产抗体，进一步节约了投资，提高了产能和产率。本文将详细介绍最新发展的两步层析主导的一条完整抗体生产纯化解决方案。
