嗜麦芽寡养单胞菌(DR-929)纤溶酶的发酵条件优化及其分离纯化

中国生物工程杂志

2007, Vol. 27

Issue (9): 47-52

研究报告

嗜麦芽寡养单胞菌(DR-929)纤溶酶的发酵条件优化及其分离纯化

王高学梁朝军黄海洪王建福原居林

西北农林科技大学动物科技学院西北农林科技大学动物科技学院西北农林科技大学动物科技学院西北农林科技大学动物科技学院西北农林科技大学动物科技学院

Optimization on Fermentation and Purification of the Fibrinolytic Enzyme from Stenotrophomonas maltophilia

全文: PDF(579 KB) HTML

摘要：

本试验研究了嗜麦芽寡养单胞菌（DR-929）纤溶酶的液体发酵条件及其分离纯化。最佳发酵条件为：可溶性淀粉2.0%，黄豆粉1.0%，酵母膏0.5%，NaCl 1.0%, CaCl2 0.02%，MgSO4 0.05%，种龄36h，发酵时间4d，初始pH 8.0或9.0，温度25℃，装样量30mL，接种量5%或6%。采用发酵液离心除菌，25%～70%饱和度的硫酸铵沉淀，Phenyl FF（high sub）疏水层析，Q-Sepharose FF离子交换层析，Superdex 75凝胶过滤层析对活性成分分离纯化。用SDS-PAGE电泳对纯化效果进行检验，结果表明在SDS-PAGE中得到单一条带，分子量28.3KD。最终纯化倍数和酶活回收率分别为271.5和24.5%。

关键词： 嗜麦芽寡养单胞菌; 纤溶酶; 发酵条件; 分离纯化

Abstract:

The optimization on liquid fermentation and purification of the fibrinolytic enzyme from Stenotrophomonas maltophilia（DR-929） was investigated in this paper.The results showed the best fermentation are amidulin 2.0%, soya flour 1.0%, yeast extract 0.5%, NaCl 1.0%, CaCl2 0.02%, MgSO4 0.05%, inoculum of 36 hours, fermental time 4d, initial pH 8.0 or 9.0, temperature 25℃, volume of media 30mL, volume of inoculum 5% or 6%.The purification process includes the following steps: removing cells by the centrifugation, 25%~70% saturation ammonium sulfate precipitation, HIC with Phenyl FF（high sub）, IEC with Q-Sepharose FF, gel filtration chromatography with Superdex 75. SDS-PAGE electrophoresis was used to examine the purification effect, and the results indicated that homogeneous strap in SDS-PAGE and has a molecular weight around 28.3KD.

Key words: Stenotrophomonas maltophilia fibrinolytic enzyme fermentation condition purification

收稿日期: 2007-06-04 出版日期: 2007-09-25

通讯作者: 王高学

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王高学,梁朝军,黄海洪,王建福,原居林. 嗜麦芽寡养单胞菌(DR-929)纤溶酶的发酵条件优化及其分离纯化[J]. 中国生物工程杂志, 2007, 27(9): 47-52.

. Optimization on Fermentation and Purification of the Fibrinolytic Enzyme from Stenotrophomonas maltophilia. China Biotechnology, 2007, 27(9): 47-52.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/ 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2007/V27/I9/47

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