目的：筛选在CHO-K1中高表达sPDGFRα-Fc的重组细胞株，并对分泌到培养基的表达产物进行抑制细胞增殖的活性分析。方法：构建带有Fc标签的sPDGFRα基因重组表达载体 pIRES-Neo3-sPDGFRα-Fc；在脂质体介导下，转染CHO-K1细胞，G418筛选2周后获得若干单克隆细胞株，随机挑取单克隆细胞进一步放大培养，RT-PCR筛选阳性单克隆细胞；Real-Time PCR方法鉴定各阳性细胞株中的sPDGFRα-Fc基因的转录水平, Western blot检测进一步验证各细胞中目的蛋白表达水平；筛选出表达最高的细胞株，更换无血清培养基培养，取含有可溶性sPDGFRα的培养基上清冻干浓缩，MTT法检测目的蛋白的抑制细胞增殖能力。结果：成功构建重组表达载体并在CHO-K1中成功表达，各阳性单克隆细胞株的表达量有差异且在转录水平和蛋白表达水平表现一致，从无血清培养基中收集的可溶性sPDGFRα-Fc明显抑制血管内皮细胞的增殖。结论：成功筛选获得CHO-K1中高表达sPDGFRα-Fc的重组细胞株，获得的可溶性sPDGFRα-Fc能抑制细胞增殖，有望成为治疗因PDGF及其受体引起的多种疾病的药物。
干旱、高盐和低温是限制植物生长和农作物产量的主要逆境因子。S-腺苷甲硫氨酸合成酶（S-adenosylmethionine synthetase，SAMS）与植物抗逆境密切相关，而且超表达SAMS的转基因植物具有更高的抗干旱、高盐和低温能力。进行条斑紫菜（Porphyra yezoensis）S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因（PySAMS）cDNA的克隆及序列特征分析。首先利用电子克隆技术得到基因相关的contig，预测全长并设计引物，最后利用RT-PCR技术成功克隆了PySAMS的cDNA序列（GenBank accession：FJ404748）。该cDNA序列含有长1155nt的完整ORF，编码蛋白（PySAMS）分子量41.8kDa，长384AA。PySAMS与盘基网柄菌（Dictyostelium discoideum）、莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）、拟南芥（Arabidopsis thaliana）和水稻（Oryza sativa）等多种生物的SAMS具有较高的序列一致性，含有与SAMS酶活性密切相关的氨基酸残基和保守序列，与人（Homo sapiens）和大肠杆菌（Escherichia coli）的SAMS具有高度相似的三维结构。所以PySAMS与其它生物的SAMS一样，在条斑紫菜的抗逆过程中发挥重要作用。研究PySAMS有助于阐明条斑紫菜耐受非生物胁迫的作用机理，有助于获得高抗逆转基因植物。
重组蛋白在大肠杆菌中表达多为无活性的包涵体形式，须经洗涤、溶解、复性后才能得到生物活性蛋白。综述了近年来包涵体蛋白分离纯化和复性技术研究进展，重点讨论了色谱法复性技术的应用，包括尺寸排阻色谱、亲和色谱、离子交换色谱、疏水相互作用色谱、固定化脂质体色谱、扩张床吸附色谱的进展情况。
