目的：研究过表达α-synuclein基因是否导致大鼠黑质纹状体选择性损伤，为帕金森病（parkinson’s disease, PD）大鼠模型的制备提供一种新的方法。方法:用腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)做载体，将人野生型α突触核蛋白(α-synuclein, NACP)引入大鼠脑内，观察大鼠行为学的改变，通过免疫组织化学染色观察其对黑质多巴胺能神经元细胞的影响，高效液相色谱（HPLC）检测纹状体多巴胺（DA）的含量。结果:α-synuclein基因过表达后大鼠出现自发性活动减少、爬行活动减慢、暂时性躯干震颤、竖毛等类似PD初期的症状和体征；大鼠脑黑质TH阳性神经元细胞随时间的延长出现数目减少，并且纹状体DA含量也出现减少，并且出现α-synuclein的积聚。结论:上述结果表明α-synuclein基因的过表达引起黑质多巴胺能神经元细胞的死亡，对大鼠的运动行为有一定的影响，产生类似于PD早期的症状与体征，与化学毒素（如6-OHDA, MPTP）诱导的动物模型相比，此法制作的动物模型可模拟PD缓慢发展的进程，为研究PD的病程进展及发病机制提供一个理想的动物模型。
目的:构建带有组织特异性FLT-1启动子的真核表达载体，检测其在转染的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中对荧光素酶报告基因表达的驱动能力。方法：采用PCR扩增FLT-1启动子，插入到pGL3-Basic-luc载体中，构建携带FLT-1启动子的真核表达载体pGL3-FLT-Basic-luc，经脂质体法转染HUVEC、HepG2、NIH3T3和HEK293细胞，于转染48h后采用双荧光报告系统检测荧光素酶表达活性。 结果:酶切及测序证实构建的pGL3-FLT-Basic-luc载体中含有序列正确的FLT-1基因启动子，双荧光报告系统检测显示，转染的HUVEC细胞其荧光素酶活性明显高于HEK293细胞（P<0.01），而转染的HepG2和NIH3T3细胞中未检测出荧光素酶表达。结论:克隆的FLT-1启动子具有较高的血管内皮特异性转录活性，可作为血管疾病靶向基因治疗的启动子来源。图
p300/CBP相关因子（p300/CBPassociated factor，PCAF）是真核细胞内一种重要的组蛋白乙酰转移酶，它主要通过催化核心组蛋白的乙酰化，促进特定基因的转录，参与细胞内多种生物学过程。国内目前尚没有制备出具有生物学活性的组蛋白乙酰转移酶PCAF的报道。为此， PCAF全长cDNA被克隆入原核表达载体pGEX-5X-1，通过对诱导条件进行优化，实现了PCAF在大肠杆菌BL21（DE3）菌株中的高效可溶性表达并进行了亲和纯化。利用体外乙酰转移酶活性分析实验，检测到所表达的GST-PCAF融合蛋白能够使组蛋白H3发生乙酰化。这种具有生物学活性的PCAF蛋白的成功制备为进一步研究PCAF的转录调控功能以及它与其它蛋白间的相互作用奠定了基础。
从HepG2细胞中提取总RNA，经RT-PCR扩增α-2,6唾液酸转移酶基因，构建于pMD-18T克隆载体中，经序列测定后与GenBank中报道的已知序列比对完全一致，再将已知目的序列插入原核表达载体pET
研究从噬菌体随机7肽库中筛选的bFGF特异性结合噬菌体的活性。采用ELISA检测3轮淘选后得到的阳性噬菌体克隆对bFGF的结合曲线。通过竞争抑制实验，分析bFGF结合噬菌体与bFGF的竞争结合活性。采用MTT法检测bFGF结合噬菌体对由bFGF诱导的Balb/c3T3细胞增殖的影响。从噬菌体肽库中淘选获得的阳性噬菌体克隆能够特异地与bFGF结合，并呈剂量依赖性，其与固相bFGF的结合能被游离的bFGF竞争抑制，并可抑制由bFGF诱导的Balb/c3T3细胞增殖。bFGF特异性噬菌体可拮抗bFGF的活性，为开发针对bFGF的抗肿瘤短肽类新药提供基础。
盐分对植物的伤害主要是Na+引起的，而Na+/H+逆向运输蛋白催化Na+/H+逆向跨膜运输，从而使质膜上Na+运出细胞和液泡膜中的Na+区隔化。这是植物尤其是盐生植物抵御盐胁迫的主要方式之一。根据不同植物编码液泡膜逆向运输蛋白基因的保守序列，设计简并引物，采用RT-PCR和RACE技术，首次从新疆盐生植物车前（Plantago maritima）中克隆到Na+/H+逆向运输蛋白基因的cDNA全长2464 bp，命名为PmNHX1(GenBank登录号：EU233808)，该基因编码区长为1 662bp，编码553个氨基酸，理论分子量为61.16kDa，等电点为7.22。数据分析结果显示，该蛋白质主要定位于液泡膜上，由12个序列保守的跨膜结构域组成，其中TM3跨膜结构域上存在“LFFIYLLPPI”-氨氯吡嗪咪结合域，并且该位点与Na+有竞争作用。PmNHX1逆向运输蛋白与其他植物逆向运输蛋白的氨基酸同源性为64％~80％。通过生物信息学方法对其理化性质和功能分析进行预测，这为进一步研究转耐盐基因PmNHX1及其功能鉴定奠定了基础。
研究了一种α-环糊精葡萄糖基转移酶的固定化和固定化酶的性质。通过对戊二醛浓度、酶量和交联时间各单因素的考察，确定了最佳的固定化条件。与游离酶相比，以DEAE纤维素为载体的固定化酶最适pH向酸性偏移，最适温度不变，pH稳定性和热稳定性都有所提高。在
1,3-丙二醇是一种重要的化工原料，其生物法生产的研究逐渐受到的关注。研究以弗氏柠檬酸菌的总DNA为模板，通过PCR分别扩增出约1.8kb（dhaF）和0.4kb（dhaG）的两个基因片段分别编码甘油脱水酶激活因子大、小亚基， 连接于pMD-18T载体，测序分析显示与GenBank中相关基因的相似性最高为86%。将两基因以多顺反子的方式与pSE380连接构建表达载体，并在大肠杆菌中进行高效表达，表达量占总蛋白的30%。将高效表达的激活因子用金属亲合层析和分子筛进行了纯化，得到电泳纯级的甘油脱水酶激活因子，SDS-PAGE分析显示：大、小亚基分子量约为63kDa和12kDa；非变性胶分析显示：全酶的分子量约为150kDa，经扫描分析推测甘油脱水酶激活因子很有可能是以α2β2方式结合的。以弗氏柠檬酸菌甘油脱水酶为研究对象，进行激活实验，结果证实该激活因子具备甘油脱水酶激活因子的功能，为进一步阐明甘油脱水酶的激活机制及1,3-丙二醇的高效生产奠定了基础。
基于表面等离子体共振技术(surface plasmon resonance, SPR)的生物传感器，能够实时监测生物分子间的相互作用，且无需标记，已被广泛应用于蛋白质组学、药物研发、临床诊断、食品安全和环境监测等领域，并且显示出广阔的应用前景。传感芯片是Biacore系列仪器的核心部件，目前芯片只能从Biacore公司购买，价格昂贵，导致很多仪器利用率低下，资源处于闲置状态。阐述了用于Biacore系列仪器的五种传感芯片（J1，C1，CM5，SA和NTA芯片）的再生制备方法，并列举了应用实例，制备方法操作简单，成本低廉。通过多年的改进与优化，制备的芯片能够达到Biacore芯片同等品质。此方法的推广，将有助于推动表面等离子共振技术在各个领域的广泛应用。
用混合酸酐法（MA）将莱克多巴胺（RAC）偶联于牛血清白蛋白（BSA），合成人工抗原BSA-RAC，用UV和SDS-PAGE鉴定；用BSARAC免疫Balb/c小鼠，细胞融合技术建立高亲和力RAC单克隆抗体（mAb）杂交瘤细胞株，体内诱生腹水法制备RAC mAb；应用RAC mAb研制RAC残留快速检测ciELISA试剂盒（RAC-Kit），并测定其性能。结果表明，BSA-RAC偶联成功，分子结合比为24.5∶1；筛选出3株杂交瘤细胞，其中最好的4D8株亲和常数（Ka）为1.65×
利用定点诱变技术构建表达质粒pET15b-MhIL-2并将其在大肠杆菌中进行表达发酵的优化研究，高效表达出可溶性的MhIL-2重组蛋白。蛋白经过亲和层析、Thrombin酶切、离子交换层析和凝胶过滤层析纯化，MhIL-2纯度达95%，且MhIL-2比hIL-2具有更强的促进T细胞增殖生物活性。
通过聚γ-谷氨酸（γ-PGA）与氯化十六烷基吡啶（CPC）的乙酸钠水溶液反应形成混悬液，采用分光光度计于波长680nm处比浊，研究γ-PGA浓度与吸收度之间的线性关系，并研究本方法测定γ-PGA的稳定性、重现性和回收率。在一定pH值和离子强度下，γ-PGA在12.5~50μg/ml范围内与CPC的乙酸钠水溶液生成的混悬液在波长680nm处的吸收度与其浓度呈线性关系，R2=0.9939.本方法在2h内吸收度保持稳定(RSD=0.154%,n=10 )，CPC法测定浓度为5,10和 40μg/ml时的平均回收率分别为86%，77%和99.75%，RSD分别为0.14%，0.23%和0.025%应用比浊法测定γ-PGA的含量方便、简洁、重现性好，可用于γ-PGA浓度的检测。
构建(β-半乳糖苷酶与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双报告基因的真核表达载体,并在真核细胞中表达。采用PCR方法从质粒pLenti6/V5-GW/LacZ 中获取LacZ全基因，与pEGFP-C1重组后构建真核表达载体pEGFP-C1-LacZ。该重组质粒经PCR和酶切方法鉴定后，在脂质体介导下转染
构建抗菌肽Bactenecin7分泌表达载体，鉴定表达产物及检测其生物活性。采用重叠延伸PCR方法拼接合成Bactenecin7基因及其相关调控元件，将目的基因克隆到穿梭载体 pMG36e中，经鉴定后电击转化乳酸菌。通过RTPCR，Western blot检测目的基因表达情况，采用琼脂扩散法对表达产物的生物活性进行初步检测。结果显示成功构建了携Bactenecin7基因的重组质粒，将重组质粒转化至乳酸菌后，该乳酸菌能有效分泌表达Bactenecin7，经体外抑菌实验证实表达产物Bactenecin7具有抑菌活性。实验表明携Bactenecin7基因的乳酸菌能有效分泌表达具有生物活性的抗菌肽Bactenecin7，为进一步研究口服重组乳酸菌进行肠道细菌感染的治疗奠定了基础。
NASBA(nucleic acid sequencebased amplification)即依赖核酸序列的扩增技术，是一种扩增RNA的新技术，是由一对引物介导的、连续均一的、体外特异核苷酸序列等温扩增的酶促反应过程。反应在
纤维素酶是一类具有多组分的复杂酶系。纤维素酶及其水解木质纤维原料的作用机制、木质纤维原料酶水解动力学等领域的研究仍需要更深层次的分析探讨，从而完善对纤维素酶的研究与认识。随着生物化学、分子生物学技术以及基因工程等多门交叉学科的快速发展，如何进一步阐明纤维素酶的结构与功能，明确纤维素酶的基因表达与调控的关系，并由此拓展更多更好的研究方法、手段, 在纤维素酶的研究方面将具有重要意义。通过协同催化作用方式和氨基酸序列的相似性介绍纤维素酶酶系的组成，概述纤维素酶各酶组分的传统检测方法，并侧重阐述各种传感器应用于检测纤维素酶活性及基因表达的进展。
癌症已经严重威胁人类的健康。从自然界中筛选更新的、更有效的抗癌药物已成为了该领域的研究重点。作为新型抗癌药物的潜在来源，众多从植物内生真菌分离的代谢产物被证明具有抗肿瘤的生物活性。这些内生真菌通常具有特殊的代谢途径，可以在其培养物中积累抗癌活性物质，如紫杉烷类、生物碱类、细胞松弛素、鬼臼毒素、布雷菲德菌素A等。将系统的介绍已分离自植物内生真菌的抗癌药物的研究进展，同时对内生真菌的抗癌药物筛选的策略和发展前景进行简要的展望。
脂肪酶在水相和非水相中都具有催化活性，在众多工业领域应用前景十分广阔。但脂肪酶的生产成本仍然过高，限制了其在某些工业领域的大规模使用。固体发酵因具有设备比较简单、能耗低、成本低、对环境危害小、易于推广等诸多优点，已逐渐成为微生物脂肪酶生产的一个重要方式。由于能源成本的抬高和人们环保意识的加强，自上世纪90年代以来，原来一直认为技术含量较低的固态发酵技术重新受到重视并得到了快速的发展。综述了固态发酵在脂肪酶生产中的应用研究，重点介绍了固态发酵生产脂肪酶的特点、脂肪酶固态发酵的影响因素及其生物反应器。
米曲霉是一种重要的微生物，在食品、酿造、商业酶和医用蛋白的生产中具有广泛的应用，该菌被美国食品与药品管理局(FDA)认定为GRAS(generally regarded as safe)级。讨论了提高同源和异源蛋白在米曲霉中表达量的几种策略，包括使用强启动子、多拷贝编码基因、优化培养基和超表达血红素结构域(HBD)等。异源蛋白容易被米曲霉蛋白酶降解，表达量往往较低,因此使用蛋白酶缺陷型宿主菌是非常必要的。另外将外源蛋白与米曲霉高分泌蛋白融合表达也是提高异源蛋白产量的有效途径。
氢气是一种理想的洁净能源。生物制氢技术具有能耗低、环保等优势，是目前国内外研究的热点。从能源和环境角度考虑，发展生物制氢技术都具有重要的意义。通过ISI Web of Knowledge网络数据库检索2000~2008年8月期间生物制氢的相关研究，利用作者共引分析方法，并绘制了知识图谱。该图谱显示出此研究领域存在两大主流学术群体：群体1，其研究焦点为光解水制氢两大类，包括藻类光合制氢和蓝细菌等光合细胞制氢；群体2，其研究聚集在厌氧发酵制氢研究方面，又分为暗发酵制氢和光发酵制氢。其中厌氧发酵制氢的研究人员比较密集，说明这方面的研究是目前该领域的重点。
