用差异显示法分析不同生长环境中的造血干细胞/祖细胞基因表达的初步研究

中国生物工程杂志

研究报告

用差异显示法分析不同生长环境中的造血干细胞/祖细胞基因表达的初步研究

李群良刘启威蔡海波谭文松

华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

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摘要： 对比分析不同生长环境中的脐血CD34+造血干/祖细胞基因表达变化。方法: 采用静态和动态培养系统培养脐血单个核细胞，1周后收获CD34+造血干/祖细胞, 提取总RNA, 用差异显示法对比分析在不同生长环境中造血干/祖细胞基因表达的差异。结果: 在所使用的差异显示条件下，得到30个差异表达基因片段，其中一个差异表达片段为RAN基因，该基因属于RAS癌基因家族，可能与造血细胞增殖有关。结论: 不同生长环境影响CD34+造血干/祖细胞的基因表达，这些差异表达的基因可为优化体外培养环境，扩增造血细胞提供分子基础。

关键词： 培养环境; 差异显示; 脐血; CD34+造血干/祖细胞

Abstract: Objective: To investigate the changes of gene expression in CD34+ hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) under different growth environments. Methods: Umbilical cord blood mononuclear cells (UCB MNCs) were cultured in static and stirred systems. After 7 days of culture, CD34+ cells were isolated and total RNA was extracted. Gene expression patterns of CD34+ cells from fresh, static and stirred cultures were compared using differential display (DD). Results: 30 gene fragments displayed differential expression levels based on the conditions of DD. One of differentially expressed genes was identified as RAN, which is a member of oncogene RAS family. This gene may be associated with proliferation of hematopoietic cells. Conclusion: Different growth environments induced differential gene expression patterns of CD34+ HSPCs. These differentially expressed genes would give new insights into optimizing in vitro environments for expanding hematopoietic cells.

Key words: Culture environment Differential display Umbilical cord blood CD34+ hematopoietic stem and progenitor cells

收稿日期: 2006-02-06 出版日期: 2006-01-25

通讯作者: 李群良

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