突变人CD59分子真核表达体系的构建和功能的初步研究

中国生物工程杂志

2005, Vol. 25

Issue (8): 98-102

论文

突变人CD59分子真核表达体系的构建和功能的初步研究

任书荣, 高美华

青岛大学医学院, 青岛 266021

全文: PDF(421 KB) HTML

摘要：

构建突变人CD59分子(HMCD59)真核表达体系,探讨HMCD59糖基化前后抗补体活性的变化。采用重组PCR定点诱变技术在CD59易于糖基化的位点构建CD59突变基因,克隆入真核表达质粒pALTER-MAX。利用阳离子脂质体将重组质粒和pcDNA3共转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。G418压力筛选稳定转染细胞克隆,检测筛选HMCD59蛋白高表达株。免疫印迹技术(Western blot)检测出HMCD59蛋白分子量约为20kDa。2,7-二羧乙基-5,6羧基荧光素(BCECF)释放实验初步证实HMCD59具有抗补体活性,糖基化后抗补体活性明显降低,为进一步研究糖尿病血管增殖症的发生机制提供了线索。

关键词： 人CD59; 基因定点突变; CHO细胞; 真核表达

收稿日期: 2005-03-14 出版日期: 2005-08-25

基金资助:

国家自然科学基金资助项目(30170983)

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引用本文:

任书荣, 高美华. 突变人CD59分子真核表达体系的构建和功能的初步研究[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(8): 98-102.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/I8/98

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