对来源于Aspergillusniger的植酸酶基因phyA进行了改造 ,去除了内含子和信号肽编码序列后重组到表达载体PET2 1a( + )上 ,导入大肠杆菌BL2 1 (DE3)中 ,构建工程菌株BL2 1 PET2 1a( + ) phyA。植酸酶基因在工程菌株中得到了高效表达。表达产物主要以包涵体形式存在 ,表达量达到菌体蛋白的 30 %以上。改进了包涵体复性技术 ,包涵体蛋白经复性、纯化后 ,生物活性达到 1 5 0 0U mg ,并且复性蛋白具有较好的热稳定性 ,经过 75~ 95℃、30min的热处理后 ,仍然保持了生物活性 ,同时有明显的热激活现象。热激活后最高生物活性达到 5 0 0 0U mg。这一发现对于植酸酶的应用研究具有一定的意义。
广东省自然科学基金资助项目(990869;980694)
魏威, 李弘剑, 李月琴, 方玲, 陈浩军, 周乐平, 何华坤, 周天鸿. 工程菌BL21-PET21a(+)-phy A表达植酸酶的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(1): 66-69.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2004/V24/I1/66
Cited