利用PCR技术分3段克隆了长约9.7kb的牛β-酪蛋白基因,分另4克隆在pGEM-T easy Vector的T位点。经NCBI Blastn分析,与牛β-酪蛋白基因相应区段的同源性为98%。这3段序 列包含完整的5’侧翼序列、前8个外显子及第8个内含子的部分序列。以此构建了两个乳腺特 异性表达栽体:利用第1段和第2段共有的酶切位点将两段融合,作为5’调控区(6.8kb),第3段 和实验室已有的600 bp的加尾信号通过重组PCR拼接作为3’调控区(3.4kb)构建了一乳腺特异 性表达栽体;以第一段作为5’调控区,实验室已有的600bp加尾信号作为3’为调控区构建了另一 乳腺特异性表达载体。可以应用于进一步乳腺生物反应器的研制。
国家“863”计划资助项目(2001AA213081)
杨瑞锋, 刘金龙, 安志兴, 李志艳, 张涌. 牛β-酪蛋白基因的克隆及乳腺特异性表达载体的构建[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(S1): 260-263.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/IS1/260
Cited