按照nanog基因编码序列设计合成引物,利用RT-PCB从小鼠的囊胚期胚胎中扩增得到该 基因,并将该基因克隆到pET-28b(+)载体上,获得pET-28b(+)-nanog原核表达重组质粒,限制 性酶分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为nanog基因编码序列。重组质粒转化大肠杆 菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达,western杂交证实该 蛋白具有6-His抗原活性,从而证实目的蛋白为Nanog蛋白。
林艳丽, 曹立雪, 吴晓洁, 阎新龙, 邓继先. 小鼠Nanog基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(S1): 257-259.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/IS1/257
Cited