为了提高人血小板因子 4(humanplateletfactor 4,hPF4)的表达 ,在PT7 7 hPF4表达质粒的基础上 ,采用PCR定位突变技术 ,改造人血小板因子 4(hPF4)cDNA基因片段 ,去除cDNA 3′端非翻译区AT富含序列 ,改用大肠杆菌强串联终止密码子TAATAA ,成功构建了高效表达质粒pBV2 2 0 hPF4。摇瓶发酵重组人血小板因子 4的产量达 1 60mg L较原表达质粒PT7 7 hPF4表达量提高了近 80倍。经包涵体的洗涤、变性、复性后 ,采用鸡胚绒毛尿囊膜血管生成抑制实验测定复性后rhPF4的生物学活性 ,结果显示 :rhPF4具有抑制血管生成活性。
山西省自然科学基金资助项目(200211017)
张俊芳, 韩兵社, 解军, 胡晓年, 牛勃, 程牛亮. 人血小板因子4在大肠杆菌中的高效表达及活性研究[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(5): 73-77.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2004/V24/I5/73
Cited