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中国生物工程杂志

CHINA BIOTECHNOLOGY
中国生物工程杂志  2008, Vol. 28 Issue (专刊): 140-143    
论文     
利用Cre-LoxP置换系统,在肝癌细胞系中稳定表达HBV的P抗原蛋白
李毅 张小花 张文露 刘湘 扬琴 黄爱龙 汤华
重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室
Targeted integration of HBp using mutant lox sites in human hepatoma cells
 全文: PDF(8164 KB)   HTML
摘要:

利用基因诱捕载体整合到人类肝癌细胞系SMMC7721细胞的染色体基因中,得到永久性高表达诱捕载体报告基因X-gal的阳性克隆,再用Cre-LoxP置换系统,将构建好的HBV-P全长片段与诱捕载体的报告基因部分交换,HBV-P全长片段完整的整合在SMMC7721细胞的染色体基因中,得到了稳定表达HBV-P蛋白的细胞系。该细胞系为制备、纯化P抗原和研究HBV-P的基因调控提供了实验材料。

关键词: HBV-P抗原稳定表达Cre-LoxP置换系统    
Abstract:

Gene trap vector pU17 can be integrated into chromosome DNA of human hepatoma cells randomly. After selected with G418, X-gal staining and PCR checking, several high X-gal expression cell colonies were obtained. A special Hepatitis B virus (HBV) polymerase full-length cDNA vector containing mutant loxP sites exchanged -geo DNA fragment of gene trap vector in these colonies with the Cre enzyme. Under rigorously selection of puromycin, a new cell line expressing HBp-His fusion protein was established. HBp protein could be identified well with the His-tag antibody. This hepatoma cell line might be a useful tool for preparation HBp protein antigen and analysis of its function.

收稿日期: 2008-03-21 出版日期: 1900-01-01
通讯作者: 汤华   
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李毅
张小花
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汤华

引用本文:

李毅,张小花,张文露,刘湘,扬琴,黄爱龙,汤华. 利用Cre-LoxP置换系统,在肝癌细胞系中稳定表达HBV的P抗原蛋白[J]. 中国生物工程杂志, 2008, 28(专刊): 140-143.

. Targeted integration of HBp using mutant lox sites in human hepatoma cells. China Biotechnology, 2008, 28(专刊): 140-143.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/        https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2008/V28/I专刊/140

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