抗菌肽CM4与人可溶性B淋巴细胞因子hsBAFF在大肠杆菌中的融合表达

中国生物工程杂志

2008, Vol. 28

Issue (3): 32-37

论文

抗菌肽CM4与人可溶性B淋巴细胞因子hsBAFF在大肠杆菌中的融合表达

刘海峰王小花刘平张双全

南京师范大学生命科学学院生化所南京师范大学生命科学学院南京师范大学生命科学学院

The expression of antibacterial peptide CM4 in Escherichia coli fused with human soluble B lymphocyte stimulator activing factor

全文: PDF(694 KB) HTML

摘要：

为进一步探讨抗菌肽CM4的原核表达及其生物学功能，本实验研究了抗菌肽CM4与人可溶性B淋巴细胞刺激因子hsBAFF的融合表达及抗菌肽CM4的生物学活性。运用PCR把B淋巴细胞因子hsBAFF和家蚕抗菌肽CM4进行基因融合，构建了融合表达载体pET28a (+)/CM4-hsBAFF，并在大肠杆菌中获得高可溶性表达的融合靶蛋白，且存在于超声破碎后的上清，经分子筛Sephadex G-75纯化后的重组融合蛋白用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定.SDS-PAGE分析表明：可以通过分子筛一步纯化得到融合蛋白，该重组融合蛋白的分子量约22.0 KDa。Western blot结果显示该重组蛋白能与鼠抗人hsBAFF的抗体发生特异性反应.运用基因工程的方法获得CM4-hsBAFF重组融合蛋白，并具有很好的抑菌生物学活性。

关键词： 抗菌肽CM4; 人可溶性B淋巴细胞因子; 表达; 纯化

Abstract:

To explore the expression and function of antibacterial peptide CM4, the expression and biological activity of recombinant fusion protein CM4-hsBAFF were studied. The human soluble B lymphocyte stimulator activing factor (hsBAFF) gene was fused to the sequence encoding CM4 to construct an expression vector pET28a (+)/CM4-hsBAFF. The recombinant protein was high expression of soluble recombinant protein in Escherichia coli cells, and existed in the supernatant after sonication. Recombinant fusion protein which was purified through size-exclusion chromatography was identified by SDS-PAGE and Western blot analysis. SDS-PAGE and Western blot indicated that recombinant protein was secreted as a protein of around 22.0 KDa and can be specially recognized anti-hsBAFF antibody. The recombinant protein can be expressed and displays antimicrobial activity.

Key words: antibacterial peptide CM4 hsBAFF expression purification

收稿日期: 2007-11-14 出版日期: 2008-03-28

ZTFLH:

R392.11

通讯作者: 刘平

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刘海峰,王小花,刘平,张双全. 抗菌肽CM4与人可溶性B淋巴细胞因子hsBAFF在大肠杆菌中的融合表达[J]. 中国生物工程杂志, 2008, 28(3): 32-37.

. The expression of antibacterial peptide CM4 in Escherichia coli fused with human soluble B lymphocyte stimulator activing factor. China Biotechnology, 2008, 28(3): 32-37.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/ 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2008/V28/I3/32

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