为对重组蛋白的表达进行直观检测并简化蛋白纯化的步骤,构建了能在大肠杆菌中表达融合蛋白的通用表达载体pHis-EGFP。该载体含有源自表达载体pET-32a的T7启动子、终止子和源自质粒pUC18的ColE1复制子与绿色荧光蛋白报告基因。应用该载体成功地表达并纯化了酵母GGDP(geranylgeranyldiphosphate,GGDP)合酶融合蛋白,结果表明所构建的载体是一个实用的表达载体,并建立了离子交换层析和亲和层析两步纯化融合蛋白的方法。
国家自然科学基金资助项目(20172071);国家“863”计划资助项目(2001AA23402)
王伟, 孟超, 朱平, 程克棣. 绿色荧光蛋白标记的表达载体pHis-EGFP的构建[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(9): 35-39.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/I9/35
Cited