RNase A及其链亲和素融合蛋白在pET系统中的表达

中国生物工程杂志

2005, Vol. 25

Issue (4): 52-55

论文

RNase A及其链亲和素融合蛋白在pET系统中的表达

刘喜朋¹, 裴冬丽², 刘建华¹

1. 上海交通大学生命科学与技术学院上海 200240;
2. 商丘师范学院商丘 476000

全文: PDF(298 KB) HTML

摘要：

在大肠杆菌中用pET28a表达载体表达重组RNaseA。变性条件下,利用His-Resin亲和纯化,得到60mg／L电泳纯的RNaseA。纯化的RNaseA复性后,利用含大量RNA分子的碱法抽提质粒为底物,测定重组RNaseA活性,与商品化的RNaseA活性相当。同时在RNaseA活性测定体系中加入4mol／L尿素会使RNA分子切割效率提高10倍左右。在此基础上,成功表达RNaseA与链亲和素(streptavidjn)的融合蛋白,经纯化复性后,该融合蛋白同时具有核酸酶、biotin结合活性,在分子生物学中具有重要的应用价值。

关键词： RNase A; 原核表达; 亲合纯化; 蛋白复性

出版日期: 2005-04-25

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引用本文:

刘喜朋, 裴冬丽, 刘建华. RNase A及其链亲和素融合蛋白在pET系统中的表达[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(4): 52-55.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/I4/52

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