根据GenBank发表的传染性法氏囊病病毒 (IBDV) 5 2 70株VP2 基因序列 ,设计合成了 1对特异扩增IBDVVP2 基因的引物。以IBDV超强毒河南分离株HN0 1感染发病鸡法氏囊组织中提取病毒RNA来制模板 ,利用RT PCR扩增出了 1 .4kb的VP2 基因 ,将其克隆到pIREShyg载体上 ,构建了pIRES VP2 真核表达载体。然后通过磷酸钙共沉淀法转染CHO细胞 ,通过潮霉素筛选得到阳性克隆 ,间接免疫荧光实验 (IFA)鉴定VP2 在CHO细胞中的表达 ,并用RT PCR的方法从转录水平证实VP2 在CHO k1细胞中的表达 ,最终建立了CHO VP2 细胞株 株。
国家“863”计划资助项目(2002AA245051)
贾赟, 张素芳, 陈溥言, 赵玉军. 传染性法氏囊病病毒VP2基因的真核表达载体的构建及表达[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(8): 68-72.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2004/V24/I8/68
Cited