人胰岛素突变体GIRR的分离纯化及性质研究

中国生物工程杂志

2004, Vol. 24

Issue (11): 46-49

论文

人胰岛素突变体GIRR的分离纯化及性质研究

解军¹, 于保锋¹, 陈显久¹, 张悦红¹, 常冰梅¹, 胡晓年², 牛勃¹, 程牛亮¹

1. 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室, 太原 030001;
2. 协和医科大学基础医学研究所, 北京 100730

全文: PDF(186 KB) HTML

摘要：

构建人胰岛素原突变体GIRR(A2 1Asn→Gly,B1 7Leu→Ile ,B31Arg ,B32Arg)基因的原核融合表达载体并进行表达和纯化 ,进一步对其性质进行研究。将人胰岛素原突变体基因重组到pTXB1融合表达载体上 ,在E .coliBL2 1 (DE3)中得到高效表达。表达产物经几丁质亲和柱层析分离以及胰蛋白酶和羧肽酶B的酶促转化等步骤 ,得到纯的人胰岛素突变体GIRR ,其纯度经HPLC鉴定达到 95 % ,氨基酸组成和设计相符 ,其受体结合活性是猪胰岛素的 1 0 5 % ,生物活性为 2 6.8IU/mg。其血浆半衰期为 2 0分钟 ,比标准猪胰岛素提高 3倍多。结果提示本突变体具有更长的半衰期 ,为长效胰岛素的制备提供了新的思路。

关键词： 基因表达; 人胰岛素突变体; 受体结合活性

收稿日期: 2004-07-26 出版日期: 2004-11-25

基金资助:

山西省青年科技基金资助项目(20031061,020011028)

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引用本文:

解军, 于保锋, 陈显久, 张悦红, 常冰梅, 胡晓年, 牛勃, 程牛亮. 人胰岛素突变体GIRR的分离纯化及性质研究[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(11): 46-49.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2004/V24/I11/46

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