U6和H1双启动子载体用于RNAi的实验研究

中国生物工程杂志

2004, Vol. 24

Issue (11): 26-30

论文

U6和H1双启动子载体用于RNAi的实验研究

蹇锐, 程小星, 彭涛, 邓少丽, 蒋静

重庆市第三军医大学微生物学教研室, 重庆 400038

全文: PDF(263 KB) HTML

摘要：

为建立一条简便、有效的构建哺乳动物细胞随机RNAi文库技术路线 ,首先通过PCR将 1 9～ 2 1ntsiRNA编码序列及终止信号等元件引入U6启动子下游 ,再将该扩增产物定向克隆至H1启动子的下游。构建的双启动子载体中 ,U6和H1相对排列 ,均以其间插入的靶序列为模板 ,分别转录出其正义和反义链 ,形成功能性siRNA。以EGFP和bcl-2为靶基因的实验表明 ,该方法构建的载体可有效地干扰相应基因的表达。

关键词： RNAi; 双启动子载体; EGFP; bcl-2

收稿日期: 2004-08-03 出版日期: 2004-11-25

基金资助:

国家自然科学基金资助项目(30370603)

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引用本文:

蹇锐, 程小星, 彭涛, 邓少丽, 蒋静. U6和H1双启动子载体用于RNAi的实验研究[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(11): 26-30.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2004/V24/I11/26

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