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中国生物工程杂志

CHINA BIOTECHNOLOGY
中国生物工程杂志  2003, Vol. 23 Issue (9): 75-79    
论文     
最早传入北京地区的SARS冠状病毒S基因序列分析和克隆
徐东平, 张政, 王福生, 王俊, 貌盼勇, 贺雄雷, 王波, 金磊, 汪健
解放军第三○二医院传染病研究所, 北京 100039
 全文: PDF(225 KB)   HTML
摘要:

SARS冠状病毒的spike(S)蛋白对病毒的致病力至关重要,也是机体特异性体液和细胞免疫主要针对的靶分子。从北京地区最早发现的SARS患者咽拭子细胞培养上清中提取病毒RNA,用反转录巢式聚合酶链式反应(RTPCR)分6个片段扩增出S基因全序列,用TA载体克隆后进行DNA序列分析,再通过重叠PCR将6个片段连接成一条完整的S基因并克隆测序。DNA测序结果表明病毒S基因序列与报告的BJ01株SARS冠状病毒S基因序列完全一致,用重叠PCR将6个S基因片段连接成了一条完整的S基因,插入到pGEMT载体后读序完全正确。上述结果表明最早传入北京地区的病毒与新近报告的BJ01株SARS冠状病毒在分子流行病学上具有同源特征,重叠PCR技术可以用于有效连接多个基因片段。S区全基因的克隆为进一步研究该基因的功能和DNA疫苗等研究提供了基础。

关键词: SARS冠状病毒棘突蛋白基因基因克隆重叠PCR    
出版日期: 2003-09-25
基金资助:

军非典型肺炎防治重大科技紧急研究计划课题 ( 0 3F0 17)

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引用本文:

徐东平, 张政, 王福生, 王俊, 貌盼勇, 贺雄雷, 王波, 金磊, 汪健. 最早传入北京地区的SARS冠状病毒S基因序列分析和克隆[J]. 中国生物工程杂志, 2003, 23(9): 75-79.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2003/V23/I9/75

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