泛素 -蛋白酶体降解途径在多种蛋白浓度的调节中发挥重要作用。泛素连接酶家族的一个成员SCF复合物 (Skp1- Cul1- F -box蛋白 )通过降解多个细胞周期调节蛋白促使细胞进入增殖周期。本文综述了SCF复合物的组成和结构以及这一复合物对细胞周期调控因子的调节作用。
丝氨酸蛋白酶是蛋白酶家族中的一大家族 ,广泛分布于细菌、病毒、真菌、植物、动物中 ,并参与生命的各种反应。随着丝氨酸蛋白酶研究的深入 ,重组表达获得大量的目的蛋白酶已成为研究该类蛋白酶的一大基础技术。本文重点综述了丝氨酸蛋白酶在不同表达系统中重组表达的优缺点及最新进展。
DNA改组技术是目前蛋白质、酶和单克隆抗体等体外定向进化的高效方法。综述了DNA改组技术的发展及其应用 ,在提高酶活性、蛋白质产量和改善蛋白质 (酶 )的性能等方面具有广泛的应用前景。
本文根据IL- 2基因定点突变研究所提供的有关IL- 2结构和功能重要信息 ,特别是某些关键氨基酸残基的改变对IL- 2生物活性影响 ,探讨了IL- 2和IL- 2受体相互作用关系、新型IL- 2的研制方法和变异IL -2作用机制 ,并提出设计新型天然IL -2单位点到多位点突变的策略 ,从而指导研制更有效或毒副作用降低的新型IL- 2类似物。
细菌人工染色体 (Bacterialartificialchromosome ,BAC)是第二代大片段DNA的克隆载体系统。因其嵌合率低 ,遗传稳定性好 ,重组DNA容易分离和制备 ,转化效率高等 ,弥补了YAC的不足 ,很快在基因组研究中处于中心地位。近年来 ,已有多种BAC载体被构建出来 ,这些BAC载体在复杂基因组大片段文库的构建 ,基因的图位克隆 ,基因组物理图谱的构建 ,基因和基因组测序 ,基因组织结构分析 ,染色体组织和进化 ,以及基因的遗传转化和调控研究中得到了广泛的应用。
介绍造血干 / 祖细胞的体外培养和扩增取得的显著进展 :包括各种生物反应器的应用 ,三维培养系统的建立。扩增后的造血细胞在动物模型和临床上的应用已取得了初步成效。
噬菌体抗体库技术的基本原理是将全套抗体可变区基因组装到丝状噬菌体表达载体内 ,与噬菌体外壳蛋白Ⅲ或Ⅷ基因融合并表达到噬菌体表面 ,以固相化的抗原作配基 ,通过吸附 洗脱 扩增的富集过程 ,筛选到与抗原特异结合的抗体克隆 ,并得到相应的抗体可变区基因。因此噬菌体抗体库技术可以被认为是体内抗体生成过程的模拟 ,首先建立足够多样性的抗体库 ,然后通过免疫亲和筛选即可能得到针对任何抗原的人抗体。该技术省时省力 ,无...
营养期杀虫蛋白 (vegetativeinsecticidalproteins ,VIPs)是苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,Bt)在对数生长中期分泌的一类新型杀虫毒蛋白。VIPs主要分为VIP1、VIP2和VIP3三种。VIP1和VIP2构成二元毒素 ,对鞘翅目叶甲科的昆虫具有杀虫特异性 ;而VIP3对鳞翅目昆虫具有较广谱的杀虫活性。VIP1和VIP2的杀虫作用机理还不清楚 ;VIP3通过诱发细胞凋亡 ,最终导致昆虫死亡 ,这种作用机理与Bt杀虫晶体蛋白的作用机理完全不同 ,这为筛选新的杀虫活性物质提供了新的思路。vip基因现已被应用于转基因杀虫植物的构建 ,得到高效抗虫的多价转基因玉米。此外 ,VIPs嵌合蛋白的构建、vip及其融合基因导入其它许多宿主微生物等方面的研究也具有诱人的潜在应用前景。
概述了微重力组织工程的产生与发展趋势。动物细胞培养技术为研究细胞的形态、结构、功能与遗传特性 ,揭示细胞分裂、组织分化、器官组织形成等生命科学领域的基本问题发挥了巨大作用 ;大规模动物细胞培养技术已广泛应用于生物制药、生产疫苗以及生物学诊断试剂。但是 ,常规培养技术无法实现由细胞重建组织这一构想。微重力组织工程利用旋转培养器产生的微重力环境与动物细胞培养技术相结合 ,使组织重建成为可能 ,成为生命科学发展史上的一个新的里程碑。
红霉素是一类广谱大环内酯类抗生素 ,在临床上具有广泛的应用。近 10年来用基因工程方法对红霉素结构改造已经取得了很大的进展。通过基因工程不仅可以改造红霉素内酯环环的大小、环的骨架和环的侧链 ,而且可以对后修饰的羟基、糖基和甲基进行改造。迄今用基因工程方法合成的新的大环内酯环结构已超过 10 0种 ,所合成的各种红霉素类似物也有数十种 ,且经过基因改造的红霉素类似物都具有生物活性。但基因工程产物产量都普遍降低 ,抑菌活性也不理想 ,因此未来红霉素基因工程研究的重点应加强产量和高活性结构筛选的研究。
骨唾液酸蛋白 (Bonesialoprotein ,简称BSP)是细胞外基质中的一种糖蛋白 ,主要分布在矿化组织中 ,参与骨代谢 ,但近年研究发现BSP在癌细胞的骨转移中发挥作用并对血管生成有促进作用。本文对BSP的结构与功能及研究状况作一介绍。
随着分子生物学与其相关技术的飞速发展 ,已克隆到了一系列的植物抗病基因和防御基因 ,加深了对植物与病原微生物相互作用分子机制的了解 ,促进了植物抗病分子机理的研究。国内外许多学者对大麦抗白粉病的分子机制进行了较系统的研究 ,在拟南芥菜中也找到了许多抗白粉病基因 ,这些结果对研究其它植物抗白粉病机制提供了线索。本文就该方面的研究进展加以阐述 ,并讨论了抗病机理在抗病育种工作中的应用前景。
综述免疫激活序列 (ISS)应用基础方面的研究进展。ISS- DNA不仅有望成为新一代高效低毒的免疫佐剂 ,而且在抗肿瘤、抗感染、促进造血、治疗免疫缺陷以及防治哮喘等方面均有非常乐观的应用前景。
利用受精卵原核的显微注射技术 ,将人类HLA Ⅱ类DRα及DRB1 0 4 0 1两种基因 ,显微注射至C5 7BL 6×DBA 1杂交小鼠受精卵中 ;并移植至假孕受体鼠的输卵管内。实验先后有 8只鼠妊娠 ,稳定遗传五代 ,经PCR检测 95只HLA DRα、DRB1 0 4 0 1阳性。α 32P dCTP斑点杂交与Southern印迹杂交鉴定出 6 8只整合含有DRα及DRB1 0 4 0 1混合型的转基因小鼠 ,有效率为 2 0 .9%。经Northern杂交[1] 和RT PCR检测 ,其HLA DRα、DRB1 0 4 0 1基因在脾脏和肾脏中均有表达。结果说明 ,携带人类HLA Ⅱ类DRα和DRB1 0 4 0 1基因的转基因动物模型构建成功。
随着对乙型肝炎治疗的深入研究 ,对乙型肝炎病毒 (HBV DNA)数量的确诊显得尤其重要。本文采用RealTimeQuantitativePCR(简称RQ PCR)方法 ,对 2 84例经ELISA检定的乙型肝炎患者血清标本进行HBV DNA定量检测。结果有 96例HBsAg(+ ) HBeAg(+ ) HBcAb(+ )的血清标本RQ PCR阳性率为 10 0 % ,病毒平均量 5 0 2× 10 5拷贝 μl;87例HBsAg(+ ) HBeAb(+ ) HBcAb(+ )的血清标本RQ PCR阳性率为 4 4% (38例 ) ,病毒平均量 1 0 2× 10 3 拷贝 μl,5 3例HBsAg(+ ) HBcAb(+ )的血清标本RQ PCR阳性率为 5 8% (31例 ) ,病毒平均量 6 6 9× 10 4拷贝 μl;而 4 6例正常对照组经检测全为阴性。可见RQ PCR的检测结果反映了不同患者的病情 ,对乙型肝炎的诊断、治疗具有临床指导价值。
不同生长素对盾叶薯蓣 (DioscoreazingiberensisC .H .Wright)愈伤组织细胞生长量的影响差异是NAA >IAA >2 ,4 D ,而对薯蓣皂甙元合成的影响是 2 ,4 D >IAA >NAA。在有生长素存在的条件下 ,光照 2 4h ,另加 0 5mg LKT促进愈伤组织细胞的生长 ,而附加 0 5mg LBA促进薯蓣皂甙元的合成 ;相反 ,光照 12h ,另加 0 5mg LBA促进生长 ,附加 0 5mg LKT促进合成。愈伤组织生长越旺 ,薯蓣皂甙元积累越少。低浓度的生长素促进薯蓣皂甙元的合成。
生化工程在生物技术中占有重要地位 ,它是上游生物技术与生物技术产业化之间的纽带。根据多年对秸秆生物技术的研究 ,结合现代生物技术和工业生态学的新思维方式 ,对现有生化工程存在的问题进行思考 ,提出生态生化工程的新概念。
用《实用密码子》计算机软件分析阿拉伯糖代谢酶C调节蛋白基因 (AraC)以及细胞周期素依赖型蛋白激酶反应蛋白基因 (C1P1)的五组重复测序结果 ,发现该软件不仅能用图示分析方法准确显示编码序列及编码容量 ,而且其依据生物界密码子偏倚规律 ,采用比较法评估高频率使用实用型密码子的优质开放读码框架。《实用密码子》能使分析者对复杂多量的核酶信息做初步筛选 ,从而取舍冗余的基因信息。
热原是微生物的代谢产物 ,是微生物的一种内毒素 ,其主要成分是脂多糖 ,分子量一般为 10 6左右。去除热原的主要方法有 :1 高温法。多在 2 5 0℃加热 30分钟以上。2 酸碱法。用酸或碱进行处理 ,破坏热原。3 吸附法。常用 0 1%～ 0 5 %的活性炭吸附处理。4 层析法。利用离子交换树脂或分子筛凝胶层析处理。5 超滤法。使用超滤装置滤除热原物质。为了保证热原符合规定 ,往往要经过多次实验才能选择合适的方法 ,设计出适宜的...
基因组学研究、生物技术及生物医药被认为是中国未来能够参与世界竞争并占有一席之地的关键领域。有关技术的知识产权是该领域至关重要的财产 ,甚至可能是有关公司的基石 ,为此需要集中相当的人力和资金进行适当保护与利用。这个道理十分浅显 ,但在实际操作中却屡见失误。比如中国科学院上海药物研究所开发的可以明显提高记忆力的研究成果石杉碱甲却因为国外已经有了专利 ,而不能进入国际市场。现在 ,除极少数大的跨国医药公司...
