采用PCR技术,删除了小鼠CREBcDNA5′端和3′端非编码序列,并引入便于基因操作的酶切位点。经30次循环的扩增,得到改造后的CREBcDNA,全长1071bp。亚克隆后,对此扩增片段进行了限制性内切酶物理图谱分析,测定了DNA序列,并以其为插入物,构建了pBV220-PCR-CREB重组表达载体。经Western印迹法分析证明,在大肠杆菌中的表达获得成功 。
余瑞元, 王燕峰, 孙久荣, 徐长法. 小鼠cAMP应答元件结合蛋白基因在大肠杆菌中的表达[J]. 中国生物工程杂志, 2000, 20(2): 55-57.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2000/V20/I2/55
Cited