人工酵母染色体(YAC)技术是人类基因组分析及疾病相关基因的分离、克隆中的关键技术。在基因组YAC文库基础上特定目的基因的分离克隆涉及YAC克隆的筛选,嵌合体、缺失体和共转染克隆的检测与处理,插入片段的分离及其结构特征的分析,亚克隆的快速构建等等。近年来,有关技术取得了重要进展,已趋于成熟,并正得到广泛应用 。
阐述了有机溶剂和水对有机相酶催化性质的影响,并评述了这一领域的应用现状和今后的发展方向:将溶剂对酶催化行为的影响定量化;改善酶与有机溶剂的不相容性;研究更多的酶以及多酶体系的催化性质;以底物活度进行动力学研究 。
本文介绍了植物细胞培养中胞内产物释放的研究现状,包括:1、化学法:(1)有机溶剂法,(2)抗生素法,(3)蛋白质、溶血卵磷脂、脱乙酰几丁质,(4)去污剂、螯合剂;2、物理法:(1)渗透压冲击,(2)温度冲击,(3)电处理,(4)超声波处理、激光打孔,3、pH扰动及生物碱在胞内积累的两种机理 。
农杆菌介导的植物遗传转化进展.李子银@胡会庆.华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室农杆菌介导的植物遗传转化进展李子银胡会庆(华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉430070)根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)和发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)是两种寄主非常广泛的土壤细菌,在自然状态下它们能通过伤口侵染植物,分别导致冠瘿瘤和毛...
基因治疗一度红红火火,激起公众极大的期望。但是初期试验远不如预期的好。科研人员理智地认识到目前阶段应把研究重点放在更基础的基因结构与功能、基因表达调控及基因载体构建研究等方面。建立人类疾病相关转基因小鼠模型是开展上述研究的一个重要基础,将为基因治疗的临床实施奠定坚实的基础 。
基于T7RNA聚合酶与T7强启动子(10)间的特异识别而建立起来的偶联表达系统在大肠杆菌中已取得了令人满意的结果。最近,该系统在酵母、昆虫、哺乳动物细胞和植物细胞中陆续实现了高效表达。T7RNA聚合酶-10启动子偶联表达系统的相对独立性和高效性,不仅预示着该系统可以在真核基因工程中发挥重要作用,而且其独特的作用机制为人们探索新的特异高效真核表达系统提供了一个可供借鉴的模式 。
新生肽链的折叠与重组蛋白可溶性表达.崔立斌@马清钧.中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所新生肽链的折叠与重组蛋白可溶性表达崔立斌马清钧(中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所100850)大肠杆菌表达系统是目前最常用的外源蛋白表达系统[1]。大肠杆菌遗传背景清楚,容易培养,能大规模发酵,以及大量可供选择利用的克隆和高效表达载体,使之成为人们克隆和表达外源基因的首选菌株[2-5]...
本文对超滤技术应用中普遍存在着的诸多重要因素进行了讨论,有些内容在一般教材和文献中较少详细论述。本文从应用者角度分析了产率、吸附、消毒和保存、温控、活性问题、压力和透过速率以及技术联用应该注意的问题,并将其与膜质量参数、膜配置选择和操作模式相关联。对活性生物样品的处理,文中给予了较多的讨论,并希望结合超滤技术自身特点,在选择和配置一节中,对系统的各组成部分进行配置优化。应用中,安全性操作也贯彻于各个问题的讨论之内。在最后,涉及超滤法进行分子量分级的问题,提出了参数上的建议 。
DNA是遗传信息的载体,需要有极高的保真度,这不仅有赖于完善的复制体系,而且还需要有能纠正已存在错误的修复系统。对于不同的DNA损伤,生物体内存在许多不同的修复系统。本文介绍三种主要修复系统即核苷酸切割修复,错配修复及转录偶联修复的分子机制,深入研究DNA修复作用对了解某些癌症成因及细胞衰老等过程有重要意义 。
用转基因植物生产外源蛋白质产品是一个有吸引力的廉价生产系统,它有可能替代外源蛋白质的发酵生产系统。通过外源基因的瞬时表达或稳定表达方式,多种疫苗已在植物中产生,在植物中表达的抗原保持了它自身的免疫原性,植物在这方面的应用具有独特的优 点。