提要 亲和层析是一种具有高度选择性的生物分子纯化方法,本文系统地介绍亲和层析通用的载体基质及其制备,并介绍不同分离纯化对象对基质的选择。
近年,全球新发现的黄金矿床主要在太平洋两岸约24个矿区,总共发现2700吨黄金,1980年来,世界产金量在增加,预测到本世纪末,黄金供不应求。尽管全球几乎处处都有黄金,但含量非常低,平均每吨地壳物质含有0.0001盎司~*黄金,一般地方的含金量低,没有开采的经济价值,以前要求每吨矿石含金量不低对3克才有开采价值,后随着勘探和开采技术的进步,每吨含金量达1克也可开采。
1988年5月12日的Nature杂志上刊登了一篇题为“一种简单的结构特征是转移RNA特异性的主要决定子”(A Simple structural feature is a major determinant of the identity of a transfer RNA)的文章,立刻引起了轰动,5月13日的纽约时报和其它有关报刊大量刊登了许多著名分子生物学家的评论文章,对此项研究结果作了高度的评价,称tRNA特异性的这一决定子为“第二遗传密码”。这个使科学家们困惑了20年之久的难题终于得到了解答。这一难题是,在蛋白质的合成过程中,在翻译中起关键作用的tRNA分子如何识别特定的氨基酸,也就是说,究竟是tRNA分子的哪一部位对氨基酸的特异性结合起着决定性的作用。
核酸探针已开始应用于临床诊断、法医鉴定、食品及加工检测,环境保护检测和农业畜牧业等领域中。美国临床化学会已把核改探针作为临床诊断的重点研究开发项目,在我国也开始了这方面的研究,并取得了一定的进展,因此,有必要对核酸探针及其在临床上的应用作一分析。
用亲和标记的方法研究重要生物蛋白专一结合位点的局部结构和功能是过去30年中出现的重要生物化学技术之一,而把这项技术用于甾醇类脱氢酶活性中心的研究还是70年代以后的事。自从Ganguly和Warren首次报道了用21—碘乙酸基可的松亲和标记20β一羟甾醇脱氢酶活性中心以来,又有一系列卤乙酸基甾醇类衍生物被合成出来用作亲和标记试剂。
固定在膜上核苷酸序列已有许多不同的非放射性检测方法。最普通的方法是在杂交探针上附加一种酶。将这种酶在杂交前与探针共价连接,或者在杂交后与探针结合。然后将膜与信号显示底物一起保温处理就可看见杂交的目的顺序位置。最常用的底物系统是色原性的,色原性系统在酶的作用下在膜上沉淀出不溶性染料。通过最佳的色原性系统可在膜上检测出约2×10~(-6)mol的酶(表Ⅰ)。从理论上讲,底物所能检出的酶的摩尔数越低,能检测目的DNA或RNA的量就越小。
医药生物技术做为当今生物技术的主要研究领域之一已取得了令人瞩目的成就。在美国,目前投放市场的生物技术产品绝大部分为医药产品,它们的开发具有速度快、产品数量多、疾病谱广、经济效益显著等特点。我国政府对医药生物技术的研究开发给予了高度的重视,据不完全统计,“七五”攻关期间组织了1200多人的研究队伍,投入了3500多万元的科研经费进行医药生物技术的研究开发工作。
最近几年,DNA重组及其遗传操作技术的迅速发展,以及植物组织培养技术的日臻完善,为植物遗传工程的发展奠定了坚实的基础。将特定的外源基因引入到受体植物细胞,并使其定向而稳定的遗传,这是常规遗传育种方法所不能比拟的。植物遗传工程在发展农业、医学、环境等方面有着巨大的实际应用潜力,日益受到人们的重视。本文介绍一些转化体系,常用基因的特性及外源基因有效地表达及其调控的问题。
是什么导引着生物技术的发展?从其纷纭发展趋势中分理出导向的“指针”,是生物技术发展战略研究必须分析的一个问题,以为生物技术进一步发展决策的指导,在这里,谈谈个人的意见,供商榷。
日本科学工作者目前建立一种方法用于大规模生产人胰高血糖素(注:原文glucogon应为glucagon),这是人胰脏产生的一类肽激素,与胰岛素作用相反,并扩大血糖含量。早些时候,尽管报道工程酵母细胞合成重组人胰高血糖素,但用于商业性生产,其生产水平仍然很低。
美国科研人员已测定萘磺酸衍生物有效抑制人免疫缺陷症病毒(艾滋病病毒,HIV)的增殖,这种衍生物在接受治疗剂量范围的适当浓度是有效的,并只产生一点不愉快的副效应,为此很寄希望此衍生化合物用于治疗艾滋病。
一、用于植物的穿梭载体 农林水产省农业生物资源研究所与美国Rutger大学Waksman研究所的Joachim Messing研究组合作开发出用于植物的穿梭载体。这种载体来自小麦病毒WDV。在分离到病毒复制的基因后,使之与标记基因和在大肠杆菌中复制所需的基因相连。这是可在大肠杆菌中插入外源基因,然后转到植物的第一种穿梭载体。它在植物细胞中增殖,产生高于常规法的外源基因表达。
肉毒梭菌毒素是人类所知的最毒物质,但极微的剂量可造福美国数以十万计的人,以减轻许多严重的运动混乱症。1990年底,美国国家卫生研究所召集的有关肉毒毒素临床应用的专家组研讨会上,正式推荐扩大肉毒毒素的医学应用,用以治疗称为强力障碍的运动混乱症。
目前测定血液凝块的技术,既昂贵、又往往不够精确,而且还可能对病人有危险。现在至少有四个公司——美国的Centocor、Cytogen、American Biogenetic Sciences Inc.和澳大利亚的Agen公司——准备改变这种局面,发展以单克隆抗体为基础的显像技术来映像血液凝块。这方面的市场潜力是巨大的,据估计美国每年有1000万人需要这方面的服务,按现在的费用说,每例手术可能要1000美元。
一、产品概述 SOD在耗氧的生物中存在,催化下列反应:2H~+2O_2~-→H_2O_2+O_2。从低等生物的微生物到高等动植物都含有SOD,在体内起防御活性氧障碍的作用。 哺乳动物细胞质中的SOD是草绿色的酶,是分子量为3.1—3.2万的亚基的二聚体,各亚基各含1原子的铜和锌。血液中的血铜蛋白、肝脏中的肝铜蛋白均为此酶。
一、产品概述 TPA是由人的血管内皮细胞产生的527个氨基酸序列组成的糖蛋白,其分子量为3万多至7万。它具有称之为索眼的结构,对构成血栓的纤维蛋白有亲和性。 血栓是血管内产生的血块,血栓一旦产生,身体末端的微细血管堵塞,导致手脚麻痹、脑梗塞、心肌梗塞等病症。
一、产品概述 促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)主要是在肾脏中产生的一种造血激素,是具有166个氨基酸残基,分子量为35000的糖蛋白。 EPO对原红细胞集落生成细胞CFU-E或其早幼阶段的BFU-E起作用,具有促进向红细胞前体细胞——网状红细胞,原红细胞的分化,并生成红细胞的作用。
据美国微生物学会会讯(ASM News)1990年12期载文介绍,最近美国对监管生物技术的几个高级委员会进行了调整。布什总统科技政策办公室(OSTP)的官员宣布:由生物技术研究分委员会(BRS)取代存在了五年的生物技术科学协调委员会(BSCC)。
