我们在这篇论文中报道了pTiB0542的物理图谱。pTiB0542是一种根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的广谱寄主的肿瘤诱导质粒。限制性内切酶BamHI消化产生42种片段,经用电泳技术分析含有pTiB0542部分重叠的克隆,结果发现它们是以环状排列的。根据pTiB0542的T-DNA区段与异源的章鱼碱Ti质粒和蓝曙红Ti质粒的T-DNA的同源性,从而确定了pTiB0542的T-DNA区段(Ti质粒移转到植物里去的那部分)。这一部位的克隆作为探针,与大豆肿瘤DNA进行Southern杂交,进一步证实这种论断。
利用λ噬菌体作为运载体,在大肠杆菌中从直接鸟枪法分离出编码地衣形芽孢杆菌热稳定α-淀粉酶的基因。将含有α-淀粉酶基因的片段再克隆进pBR322,并测定了它的限制性图谱。头肠杆菌克隆子所产生的α-淀粉酶保留了地衣形芽孢杆菌酶的热稳定性。检定了在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中这二基因产物的表达及性质。
重复序列组成了高等真核生物基因组的大部分。当比较有关种类的基因组时,所观察封的许多变化发生在重复部分。比较种之间的任何特定序列的难易程度取决于该基因组中的顺序结构。尤其是对Southern吸收杂交产生扩散的重复序列难以定量,然而这些可能又是特别重要的序列。 可以使这样的序列定量的一种方法是滤纸结合杂交,称槽-吸收(Slot-blotting) 。
引言 近几年来,在DNA序列水平上对质体基因组的结构做了广泛的研究。与之相比,对于叶绿体基因表达机理,为叶绿体RNA聚合酶所使用的促动子的组成分,以及对转录活性的时间和发育控制的调节区域却知道得很少。随着具有转录活性的叶绿体DNA蛋白质复合体——有转录活性的染色体(TAC)的分离,更详细地研究叶绿体核蛋白 。
前言 生产单克隆抗体的方法已有如下三种:①培养由淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合所得到的杂交瘤细胞(hybridomas)的方法;②培养由病毒引起淋巴细胞性状转变所得到的产生抗体细胞株的方法;③先从杂交瘤细胞等中抽出编码抗体分子的mRNA,再由基因重组法培养大肠杆菌等而获得单克隆抗体的方法。
在玉米中发现转位遗传因子是三十年前的事(McClintock,1951 a)。当时,B.McClintock证明:转位因子插入基因或从基因中切除能引起不稳定的突变。这些突变型中,有一些突变型基因表达的水平不同,这取决于基因组的其它地点转位因子存在与否,根据这些观察,McClintock不仅提出了转位遗传因子的见解,而且还提出了基因表达是可以调节的概念(控制因子,controlling elements)。
用T_4多核苷酸激酶标记DNA5′端: T_4多核苷酸激酶(T_4感染E.coli)此酶催化ATP之r位磷转移到DNA或RNA的5′OH上的反应。
美国科学家已使得一种酶从一个有机体的DNA中精确地切下完整单一的基因。这种酶正好在基因的首端和尾端而不是在中间切割,从而为遗传工程学家们按照意愿杂交和重组基因提供了一个新的精密工具。他们的工怍还可能导致对于分隔有用基因的所谓“无用”(junk)DNA结构特点作出新的揭示。
据《生物工程新闻》(1985,5(4):1-2)报道,美国费城科学家与比利时科学家合作已把苏芸金杆菌毒素基因插人烟草植物细胞中,使该植物获得抗某些有害昆虫的能力。
继1983年构建“超级鼠”获得成功后,美国科学家又用基因工程方法将人生长激素基因整合到绵羊和猪受精卵基因中,然后再将其放回到绵羊和猪的子宫内着床发育,从而获得比现有的绵羊和猪大两倍的“超级羊”、“超级猪”。
人生长激素是调节代谢各方面的关键激素之一。继七十年代后期首次细菌合成生长激素抑制素(somatostatin,1977)、生长激素(1979)胰岛素(1979)和其他激素(BXO,1984,29:195-204)之后,苏联科学工作者(M等,1985)。
一、日本把菜豆基因通过根癌农杆菌的Ti质体(带kan~R)插人烟草和矮牵牛植物中培育出含有菜豆蛋白质的烟草和矮牵牛植株,培育三代均能结实。 二、巴西用遗传工程技术把含有丰富蛋白质的巴西果核的基因转移到莱豆(Phaseolus Vulgaris)中获得成功,从而培育出“超级豆”,比一般豆科植物的蛋氨酸高四倍。
据全国精神卫生研究所和韦恩州立大学的研究人员称,机体化学的遗传传递异常可使某些人易患躁郁症。然而,明显的遗传标志的发现虽然暗示着特异的化学异常人易患躁郁症,但仍不能下结论说已经揭示了患躁郁症的病因。
日本三得利公司和宫畸医科大学已成功地用rDNA技术生产被认为能引起肾排泄尿钠的人心房钠尿肽激素γ—hANP。它也有助于降低血压。
本周,加州埃默里维尔奇隆(Chiron)公司的科学家们宣布,他们同加利福尼亚大学一起克隆了编码能引起获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的病毒基因的完全序列。这就展示了获得制造AIDS疫苗和建立诊断试验所需病毒蛋白的可能性。
本书重点介绍美国遗传工程公司、机构、地点、研究内容及产品;美国一些与遗传 工程有关的企业,这些企业虽不归属于遗传工程公司,但在这些企业中有部分工作与遗传工程有关,并介绍了其地址、机构、经营设置及研究工作情况和产品;
本书为美国冷泉港实验室高级细菌遗传学课程所采用的实验性手册,书中较为详细介绍了有关基因融合、转座子及重组DNA实验方法、技术操作及其在大肠杆菌遗传学分析中的应用。从三个方面介绍了本书的大概内容:第一部分描述了在多拷贝质粒上克隆LacZ的基因融合,14个具有普遍意义的分子遗传学实验原理、操作及其评论;
本书自1927年问世以来,已再版十次。它系欧美微生物学实验室必备的,具有一定权威性的实用手册。书中包括了几乎全部微生物培养基的配法和各种配方成分、这些成分的性能及各种微生物对其所产生的反应。
本书由日本遗传工程界的60多位科学家,从各自擅长的方面撰写而成。
