今天,人们听到“生物工艺学”、“遗传工程”和“重组DNA”这些名词的机会,明显地多起来了。这方面的研究,已经向实际应用方面发展。看来这些技术已经引起各阶层人士的注意和兴趣。但是,人们又对这突然出现的热潮感到茫然。
近年来,含有单链DNA的大肠杆菌噬菌体M13,fd和fl迅速发展为一类新的DNA克隆载体,由于它们具有某些其他载体所没有的优点,因而正在得到广泛应用。 一、基本性质 单链DNA噬菌体按其形态可分为两类:1)多面体单链DNA噬菌体,如G4,φX174,S13等。2)丝状单链DNA噬菌体,包括M13,fd和fl。M13和fd的全序列已
虽然大肠杆菌普遍地用来作为已克隆基因表达的寄主,可是用其它的细菌,如枯草杆菌,来制造病毒或真核生物的多肽,可能是有好处。枯草杆菌是一个非致病的革兰氏阳性细菌。它不像大肠杆菌那样产生内毒素,并还能大量地分泌几个胞外蛋白。在商业上需氧芽孢杆菌的菌株被广泛地用来生产酶和抗菌素。在日本,枯草杆菌(纳豆)被用作食品的一种来源供人们消费。现有的大量培养枯草杆菌的方法,以及从其培养液中分
把克隆的外源基因引入组织培养的哺乳动物细胞的方法,已用来鉴定体内转录所必要的DNA序列。不过,这种系统对分析组织特异的基因表达所必要的序列的有用程度如何,现在仍不清楚。关于这种分析,更合适的途径也许是培养出一批这样的小鼠,即在它们的整个发育过程中,所有的细胞内均含有一种克隆的外源基因。这可以通过把一
将化石资源大量地用于生产肥料,这对它们今后的继续存在是有危险的。生物圈的维持是靠由生物进行的元素循环。由生物进行的固氮量相当大,但它只在一部分植物中起着积极的作用。固氮菌几乎均为原核生物,将其与肠道细菌相比,有关的基础知识还不多,直到最近还不知道有巨大质粒的存在。现在已经知道,在豆科根瘤菌的质粒
从发现反转录酶以来,十多年间,反转录产物在阐明分子生物学、分子遗传学、肿瘤病毒学和发育生物学中的应用得到了广泛发展。用反转录酶合成的cDNA为研究真核生物基因组的结构和功能开创了巨大可能性。在研究基因出现频率、mRNA代谢、异质核RNA代谢、mRNA结构、染色质离体转录,基因的分离和无性繁殖等工作中,已广泛采
花椰菜花叶病毒(CaMV)DNA作为把外来DNA引入植物的一种候选载体而引起人们的注意,因为它只要擦在叶子上就能引入植物。CaMV基因组为环状双链DNA,长约8kb,全部按顺序排列。从该病毒分离出来的DNA有一
从大量的单个有机体中快速分离DNA的这种能力大大地促进了对这些有机体的基因组的特性的鉴定。特别是应用DNA重组的技术,从含有克隆DNA片段的有机体中快速分离DNA的这种方法大大地促进了对这些克隆的鉴定。这里所叙述的方法是用于从细菌、酵母及组织培养细胞中分离DNA的方法。但是,这些方法是很通用的方法,可以用于从任何有机体中分离DNA。用这些方法得到的DNA制品虽然不是纯的DNA,但是对
高比强〔r—~(32)p〕ATP是核酸结构功能研究中常用标记化合物,它在DNA重组、分子杂交和核酸的结构分析中起着重要作用。下面我们从《Methods in Enzymology》Vol 65摘译合成高比强〔r—~(32)p)ATP的方法供大家参考。 10倍浓度反应液(贮于-20℃,每100μl为一份):
在DNA的结构与功能研究中,其5′端~(32)P标记是常用的有效技术。下面我们从《Methods in Enzymolgy》Vol 65中摘译了DNA 5′端脱磷及~(32)P标记方法,供大家参考。 1.用磷酸单酯酶除去DNA链5′末端磷
从转化、转染或转导的细菌群体中选择被研究的重组体,这类工作同所采用的克隆化的方案的关系甚为密切。例如,如果被克隆的基因是由纯化的mRNA合成的cDNA,那末重组体的选择工作就比较简单,只要筛选少量的克隆便可获得所需要的克隆。而要从哺乳动物基因文库的全部重组体中选择出一个特殊的单考贝基因序列,则需要有比较
1.X1776的组建 表格C列出从X1276到X1776的谱系。选择X1276作为饰变起点是因为(1)它具有在菌株组建和安全性方面有用的遗传标记;(2)80～90％染色体来自W1485;(3)能产生在研究质体嵌合体表达方面有用的微细胞。组建X1776的基本目的是确定一定的遗传标记群能否阻碍细胞壁的合成和消除细胞在非实验室控制的环境下的存活能力。在
在快速发展的科学领域中,也包括基因技术。加利福尼亚生物技术厂商,第一次用基因技术把人的γ-干扰素从操纵的大肠细菌中制造出来。医生们早就期待这种γ-型干扰素能作为防癌药物。同样在实验室中,也从酵母细胞制造出人的α-干扰素。这是用大肠细菌来代替人的生活物质(如激素)的制造者的很重要的步骤。与细菌不同,酵母菌
据《科学报》(1982.6.3)报导,中国科学院上海生化所科研人员成功地将我国的adr型乙型肝炎病毒基因组转移到细菌中无性繁殖获得成功。上海生化所从1980年底开始进行乙型肝炎病毒基因工程的研究,1981年上半年起从我国乙型肝炎病毒携带者的血浆里分离、纯化出adr型病毒基因组(DNA),与上海卫生防疫站协作,于1982年初成功地完成了乙型肝炎病毒adr型基因组在细菌中的无性繁,成功率是很高的。他们的
近年来,为研究那些能在胚胎发育期间控制基因的时间和组织专一表达的DNA序列,一部分实验工作者已将克隆DNA注入早期鼠胚,看看基因能否稳定地整合入哺乳动物的种系中去。希望受过这种注射的鼠胚能长成成鼠,在其卵子或精子中携带有插入于染色体不同部位的同一外源DNA。这些个体的后代于是会生出小鼠的亚品系,在它们的所有细胞中从发育一开始便有插入的DNA,这样就可以估价邻近序列、染色质结构和DNA
最近,苏联科学院院士、分子生物学研究所付所长在“科学与生活”(11/1981)上发表文章说:不久前苏联党政作了关于物理—化学生物学和生物工艺学进一步发展及其所取得的成就用于医药、农业和工业的决定。
据英国专利报导,通过细菌供体劈开的DNA,继之与一种载体DNA片段结合,制备含有淀粉酶基因的重组DNA[注:载体指的是由质粒或λ噬菌体衍生物所组成]。所得含有重组DNA的无性系,可用作α-淀粉酶、β-淀粉酶或支链淀粉酶的生产。作者
据Federal Register(1982,47卷3期)报导,美国卫生研究院涉及重组DNA分子研究在准则指导下考虑如下两项活动: 一、Minnetonka股分有限公司(Minnesota)分子遗传学工作者请求允许克隆FMDV亚基因组片段,要求批准转移少于FMDV全基因组的75％组成E.coli k-12 cDNA的无性系(注:此病毒来自Plum岛动物疾病研究中心)和批准在P_1牵制条件下用这些无性
印度总理英迪拉·甘地今年一月初宣布:为了跟上国外发展的形势,政府同意成立全国生物工艺学委员会(National Biotechnology Board)以协调这一领域的研究工作。 政府将在今后的三年为生物工艺学领域的研究拨出1500万英镑。高级官员们希望不要成立新的研究机构或是支持经济上太危险的计划。他们希望现有的研究所调整或扩大
培养玉米细胞的能力是进行遗传选择的基础。选择遗传变异体的方法参照了微生物学家研究细菌所常用的方法,尽管在细节上是不一样的。 格林与他的同事发现,在培养中加入赖氨酸与苏氨酸,就会抑制玉米细胞的生长。加入某些部分代谢小径是共同的其它氨基酸(如蛋氨酸),或它们的代谢前体就可以解
目前已知的酵母载体都是用2μ-质粒或用酵母染色体的复制起始区域作为复制子。这些载体有一个很大的缺点是它们不稳定,即在选择培养条件下容易消除。特别是根据染色体复制起始区域构建的质粒尤其不稳定。再就是并不是各种酵母和其品系都含有2-μ质粒或其类似物。
目前已鉴定出2000种遗传疾病,某些基因决定人体的每一个部分如何发育,通常还决定那些部分所发生的病变,如镰状细胞贫血症就是一种致命性的遗传病,往往出现成年人血球里,使血球“超绉纹”或“镰刀状”,受基因所控制。娄-纳二氐(Lesch-Nyhan)综合症缺失一种酶而造成的遗传病也是受一种基因所控制。防治遗传病正是分
近年来,美国生物工学工业的发展异常迅速,兴建了150多个以研究为主要目标的小公司,专门从事这一行业。据不完全统计,对这些小公司的投资额已超过5亿美元(见附表)。若考虑到化学、制药工业等老公司的投资,用于这方面的投资总额可能要比上述数字高出好几倍。生物工学工业的繁荣由此可见一斑。
