选用毕赤酵母偏爱密码子 ,设计合成了新型抗菌肽基因。所合成的magainin基因和cecA mil杂合肽基因全长分别为 1 0 1bp和 60bp ,并在其N端引入kex2裂解位点 ,以保证表达抗菌肽具有天然N端。其中 ,cecA mil杂合肽基因根据cecropinAN端第 1~ 7个氨基酸残基、melittinN端第 5~ 1 2个氨基酸残基所设计合成。基因分别克隆入pPICZα A质粒 ,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα A mag和pPICZα A CM。在AOX1 (醇氧化酶 )启动子调控下 ,类似天然抗菌肽大小的magainin及cecA mil蛋白获得分泌表达 ,其表达量分别为 1 0 5mg L和 1 1 8mg L。初步抑菌活性测定 ,显示两者对金黄色葡萄球菌及E .coliDH5α有较好的抑杀活性。
张素芳, 贾赟, 蔡梅红, 仇妍虹, 陈溥言. Magainin和cecA-mil抗菌肽基因的密码子优化及在毕赤酵母中的高效表达[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(7): 93-97.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2004/V24/I7/93
Cited