经发酵大量表达重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)。SDS-PAGE发现rhOP-1表达量占细菌总蛋白的35%。菌体经裂解、洗涤后,用8mol/L尿素溶解包涵体,离心后提取目的蛋白。经离子交换色谱法对变性状态下的目的蛋白进行纯化,绝大部分杂蛋白被去除,目的蛋白纯度达93%以上。为进一步提高目的蛋白浓度,采用分子排阻色谱法对目的蛋白进行再次纯化,纯度达98%以上。利用降低尿素梯度的方法对纯化的蛋白进行复性,二聚体的含量在50%以上。Westernblot证明了复性后的目的蛋白以单体和有活性的二聚体的形式存在。
国家“863”计划资助项目(2003AA2Z3532)
赵甜娜, 王世立, 韩金祥. 重组人成骨蛋白-1的离子交换及分子排阻色谱法纯化及其复性研究[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(12): 70-74.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/I12/70
Cited