以重组质粒pUC-BMP2为模板PCR扩增人BMP-2成熟肽编码序列,将该序列克隆入pGEM-T载体进行DNA序列分析后亚克隆入分泌型毕赤酵母表达载体pPIC9K中。重组质粒oPIC9K-BMP2经BelⅡ酶切后回收线性化片段,聚乙二醇法转染毕赤酵母茵株GS115。PCR筛选整合有人BMP-2基因的酵母细胞重组子,以甲醇进行诱导表达,于酵母细胞培养基中可检测到rhBMP-2。体外培养条件下,所得rhBMP-2可增加2T3小鼠成骨细胞内碱性磷酸酶活性;体内实验.rhBMP-2冻干粉可于小鼠骨四头肌肌袋中诱导软骨细胞群产生。
天津市自然科学基金重点项目(023105311)
梁东春, 左爱军, 王宝利, 郭刚, 张镜宇. 人骨形态发生蛋白2(BMP-2)在巴斯德毕赤酵母中的表达[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(7): 61-65.
https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/I7/61
Cited