抗Aβ人源融合抗体在毕赤酵母中的高效表达纯化及性质研究

中国生物工程杂志

2005, Vol. 25

Issue (6): 40-44

论文

抗Aβ人源融合抗体在毕赤酵母中的高效表达纯化及性质研究

刘立颖¹, 许士奇², 赵雪梅¹, 杜洪震¹, 张伟¹, 梁平¹

1. 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学研究院病理室北京 100005;
2. 承德医学院微生物与免疫学教研室承德 067000

全文: PDF(669 KB) HTML

摘要：

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受严格调控的醇氧化酶启动子的控制下由甲醇诱导表达,并利用α因子前导肽引导融合抗体分泌。载体线性化后整合入甲醇营养型酵母Pichiapastoris(Pp)GS115基因组中,经鉴定表达单位具有良好的遗传稳定性。对筛选得到的高分泌表达融合抗体的细胞株进行表达和培养条件的优化,使诱导上清液中融合抗体的产量选到100mg／L。利用ProteinA层析柱分离、纯化,获得纯度较高的融合抗体。经鉴定分析其具有正确的分子量和N末端,且融合抗体可与Aβ抗原结合并能吸引巨噬细胞吞噬和清除抗原抗体复合物,具有抗体生物学活性。这是首次利用甲醇营养型酵母表达系统成功实现了抗Aβ融合抗体的高效分泌表达及产物纯化鉴定,为进一步研究AD及其治疗提供了新的途径。

关键词： Aβ; 融合抗体; 毕赤酵母; Fc段

出版日期: 2005-06-25

基金资助:

国家“863”计划资助项目(2001AA215331)

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引用本文:

刘立颖, 许士奇, 赵雪梅, 杜洪震, 张伟, 梁平. 抗Aβ人源融合抗体在毕赤酵母中的高效表达纯化及性质研究[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(6): 40-44.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/I6/40

[1]	陈中伟,郑璞,陈鹏程,吴丹. 耐热植酸酶突变体的筛选及性质研究 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(2/3): 30-37.
[2]	陈鑫洁,钱芷兰,刘启,赵清,张元兴,蔡孟浩. 毕赤酵母底盘芳香族氨基酸合成途径改造生产肉桂酸及对香豆酸^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(10): 52-61.
[3]	石鹏程, 纪晓俊. 酵母系统表达人表皮生长因子研究进展 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(1): 72-79.
[4]	田园,李艳玲. 基于重组毕赤酵母的fusaruside生物合成 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(7): 8-14.
[5]	彭强强,刘启,徐名强,张元兴,蔡孟浩. 新型重组毕赤酵母产人胰岛素前体的表达工艺研究 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(7): 48-55.
[6]	严建,贾禄强,丁健,史仲平. 甲醇周期诱导控制强化毕赤酵母生产猪α干扰素 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(6): 32-40.
[7]	姚银,闵琪,熊海容,张莉. 木聚糖酶和甘露聚糖酶在毕赤酵母中的共表达及产酶分析 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(3): 37-45.
[8]	张文玉,魏东升,钱江潮. 共表达PDI1、MDH1和HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡糖氧化酶的影响 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(10): 24-33.
[9]	王彤,徐岩,喻晓蔚. 毕赤酵母Kex2蛋白酶的同源表达及酶学性质 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(1): 38-45.
[10]	程功,焦思明,任立世,冯翠,杜昱光. 枯草芽孢杆菌壳聚糖酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖及其组分分析 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(9): 19-26.
[11]	唐健雪,肖永乐,彭俊杰,赵世纪,万小平,高荣. 融合抗菌肽基因在重组毕赤酵母的表达及体外活性研究 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(6): 9-16.
[12]	张潘潘,许延吉,王之可,刘晓,李素霞. 重组猪胰蛋白酶及其R122位点突变体在毕赤酵母中的高效表达及其性质研究[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(5): 56-65.
[13]	黄鹏,杜望春,施尉珺,饶玉良,孙庆文,张宁. 人源类溶菌酶蛋白6的功能研究及生理特性分析 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(3): 1-8.
[14]	焦思明,程功,张毓宸,冯翠,任立世,李建军,杜昱光. 里氏木霉几丁质酶表达及其水解产物组成与结构分析 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(10): 30-37.
[15]	黄鹏,阎丽萍,张宁,石金磊. 利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达人鹅型溶菌酶2 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(10): 55-63.

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