HIV假病毒用于p24抗原检测试剂研制的研究

doi:Q819

中国生物工程杂志

2010, Vol. 30

Issue (08): 13-16 DOI: Q819

研究报告

HIV假病毒用于p24抗原检测试剂研制的研究

赵赫龙^**,赵鹏翔^**,李政,马雪梅^***,钟儒刚,曾毅

北京工业大学生命科学与生物工程学院北京 100124

Research on HIV Pseudovirion as Positive Control for p24 Antigen Detecting Kit

ZHAO He-long,ZHAO Peng-xiang,LI Zheng,MA Xue-mei ,ZHONG Ru-gang,ZENG Yi

College of Life Science and Bioengineering, Beijing University of Technology, Beijing 100124, China

全文: PDF(418 KB) HTML

摘要：

为了解决在研制新型HIV检测试剂盒时遇到的p24蛋白阳性对照物保存不便、阳性对照物稳定性不高以及蛋白结构和聚集形式与天然HIV病毒的p24存在差异等问题，通过将改造的HIV-1骨架质粒pNL43 EGFP R-E-和包膜蛋白质粒pGX-C共转染293T细胞后分离细胞培养液，获得具有单轮感染活性的HIV-1假病毒。通过对此假病毒颗粒的天然衣壳蛋白p24和市售HIV检测试剂盒中的p24蛋白阳性对照物的阳性反应有效性和保存稳定性的检测，证明了HIV-1假病毒p24蛋白具有更易保存、更稳定、更接近天然病毒p24蛋白的优点，适宜作为HIV检测试剂盒阳性对照物。

关键词： 假病毒; HIV-1; p24; ELISA

Abstract:

A new kind of p24 antigen positive control was developed to provide a better solution to the problems encountered in developing a novel HIV detecting kit, such as (a) inconveniency in storing p24 positive control, (b) difficulty in maintaining p24 antigen activity, (c) differences in protein structure and aggregation mode between recombinant p24 antigen and natural p24 antigen. Modified HIV1 skeleton plasmid pNL43 EGFP R-E-and envelope protein plasmid pGX-C were co-transfected into 293T cell, and then culture fluid containing single-round HIV pseudovirions were collected. This kind of HIV pseudovirions possess natural core shell protein p24, which could be used as the positive control for detection of HIV p24 antigen. Through comparison of activity and stability between pseudovirion p24 antigen and positive control in common detecting kit, it was proved that pseudovirion p24 is more convenient to store, more stable and more similar to natural p24 protein structure and aggregation mode than common recombinant p24 protein.

Key words: Pseudovirion HIV-1 p24 ELISA

收稿日期: 2010-03-16 出版日期: 2010-08-25

基金资助:

国家大学生创新实验计划（081000514）、北京市科委重大项目(D0906003000091)资助项目

通讯作者: 马雪梅 E-mail: xmma@bjut.edu.cn

	服务
	把本文推荐给朋友
	加入引用管理器
	E-mail Alert
	RSS
	作者相关文章
	赵赫龙
	赵鹏翔
	李政
	马雪梅
	钟儒刚
	曾毅

引用本文:

赵赫龙赵鹏翔李政马雪梅钟儒刚曾毅. HIV假病毒用于p24抗原检测试剂研制的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2010, 30(08): 13-16.

DIAO He-Long, DIAO Feng-Xiang, LI Zheng, MA Xue-Mei, ZHONG Ru-Gang, CENG Yi. Research on HIV Pseudovirion as Positive Control for p24 Antigen Detecting Kit. China Biotechnology, 2010, 30(08): 13-16.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Q819 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2010/V30/I08/13

［1］ Mascola J R, Louder M K, Winter C, et al. Human immunodeficiency virus type 1 neutralization measured by flow cytometric quantitation of singleround infection of primary human T cells. Virol, 2002, 76 (10): 48104821.
［2］仇超,彭虹,黄相刚，等. 携带绿色荧光蛋白基因的单轮感染活性HIV假病毒的建立及其活性检测. 中华微生物学和免疫学杂志, 2006, 26 (5): 394398. Qiu C, Peng H, Huang X G, et al. Chin J Microbiol Immunol, 2006, 26 (5): 394398.
［3］ Weber B, Gurtler L, Thorstensson R, et al. Multicenter evaluation of a new automated forthgeneration human immunodeficiency virus screening assay with a sensitive antigen detection module and high specificity. J Clin Microbiol, 2002, 40:19381946.
［4］Xu Sihong, Song Aidong, Li Xiuhua, et al. Studies on national reference of HIV1 P24 antigen. Virologica Sinica, 2006 (2): 102105.

[1]	李金晶,许菲,季艳伟,舒梅,涂追,付金衡. 抗c-Myc标签纳米抗体的筛选与应用[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(2): 61-67.
[2]	袁雅红, 赵珊珊, 王小莉, 腾智平, 李东升, 曾毅. HIV-1 Tat蛋白抑制骨髓间充质干细胞的造血支持功能[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(6): 1-8.
[3]	吴孟玲, 周嘉旺, 杜军. Nodal检测双单抗夹心ELISA法建立及应用[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(3): 51-57.
[4]	王小莉, 余庆, 袁雅红, 腾智平, 李东升, 曾毅. 打靶恒河猴CD4⁺ T细胞的TRIM5α基因影响其感染HIV的能力[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(2): 15-19.
[5]	刘俊伟, 常瑞恒, 回鹏, 董士尚, 王金凤, 孙波, 杨诚. 抗埃博拉病毒核蛋白抗体的制备与双抗夹心ELISA检测方法的建立[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(10): 53-59.
[6]	庞倩, 马榆, 李诚, 刘韫滔, 刘书亮, 王小红, 刘爱平. 基于CDR2和CDR3区随机突变筛选抗黄曲霉毒素B1单域重链抗体的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2016, 36(7): 21-26.
[7]	刘爱平, 李诚, 刘书亮, 王小红, 陈福生. 抗黄曲霉毒素B1单链抗体在Sf9昆虫细胞中的表达与性质分析[J]. 中国生物工程杂志, 2016, 36(5): 40-45.
[8]	龚隆财, 罗镇明, 杨雁青, 王振宇, 向军俭, 王宏. cTnI-linker-TnC融合蛋白的原核表达及鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(4): 48-53.
[9]	李多, 杨丽娟, 赵玉娇, 潘玥, 陈俊英, 付娟娟, 黄新伟, 邱丽娟, 孙强明. 研究报告重组Ⅱ型登革病毒NS1的表达及其免疫原性的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(9): 4-8.
[10]	李中华, 肖运才, 毕丁仁, 胡思顺, 吴仁蔚. IBV核蛋白的表达纯化及在监测中应用[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(4): 65-70.
[11]	朱羿龙, 李昌, 郭焱, 刘存霞, 杜寿文, 王茂鹏, 金宁一. *表达HIV-1 gag重组鸡痘病毒的构建与筛选*[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(1): 57-63.
[12]	聂伦, 吴文言. RANTES衍生物与HIV-1进入抑制剂[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(2): 96-102.
[13]	田青华, 林雨, 黄岂平, 冯全义, 张晃猷, 张义国, 吴泽志. PDMS微柱阵列型拓扑结构基底对肝癌细胞HepG2形态及功能基因表达的影响[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(10): 4-13.
[14]	刘斌, 刘昕, 李杉, 何红秋, 张小轶, 谭建军, 陈慰祖, 王存新. HIV-1整合酶链转移反应抑制剂的荧光筛选方法[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(1): 67-71.
[15]	刘雅莉, 刘芳, 韩舜愈, 刘箐, 孙志博, 夏俊芳, 朱小清. 九种单核细胞增生性李斯特菌检测技术效果比较及评价[J]. 中国生物工程杂志, 2012, 32(6): 84-92.

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed