牛精子蛋白质组学技术平台的建立及冻融前后精子差异蛋白初步分析

中国生物工程杂志

2008, Vol. 28

Issue (7): 37-42

综述

牛精子蛋白质组学技术平台的建立及冻融前后精子差异蛋白初步分析

陈龙朱化彬沙里金韩伟东王栋王宗礼郝海生杜卫华程金华

中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中华人民共和国农业部畜牧业司中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

Establishment of proteomics methods of bovine spermatozoa and initial analysis of the differential proteins between the fresh and frozen-thawed spermatozoa

Long CHEN hua-bin ZHU Zong-li WANG

全文: PDF(6948 KB) HTML

摘要：

本研究通过探索不同的精子蛋白制备方法、水化液成分和优化2D电泳程序以建立牛精子蛋白质组学研究技术平台，同时以牛鲜冻精为实验材料通过差异凝胶电泳寻找冻融前后精子蛋白的改变。结果表明：使用改进的热TRIzol法裂解精子细胞制备蛋白，结合优化的2D电泳技术可建立稳定的牛精子蛋白质组学研究技术平台。差异凝胶电泳揭示牛精子在冻融后有质和量的改变：冻融后缺失的蛋白点有20个，表达下调的有2个，表达上调的有10个。作为一项阶段性的实验成果，本研究建立的2D平台和所发现的冻融引起的差异表达蛋白质点为揭示冷冻损伤机理和性控精液的差异蛋白质组学研究奠定了较好的基础。

关键词： 精子; TRIzol; 差异蛋白

Abstract:

Abstract The proteomics technique platform of bovine spermatozoa was established by exploring the different sample preparation methods, the components of rehydration solution and optimizing the 2D electrophoresis protocols. The differential proteins between the fresh and frozen-thawed spermatozoa were also explored. The results indicated that the technique system with the high qualitative and stable 2D image had been obtained by preparing the bovine spermatozoa proteins with the heat TRIzol method and combining with the optimized 2D electrophoresis protocols. The differential in-gel electrophoresis showed that 20 protein spots were absent in quality, 2 spots decreased and 10 spots increased significantly in quantity after frozen-thawed. As a intermediate result, the 2D platform established in the research and the differential proteins found between fresh and frozen sperm will provide better basis for revealing the cryodamage mechanism of sperm cryopreservation and studying the differential proteomics of the X, Y spermatozoa.

Key words: spermatozoa TRIzol differential proteins

收稿日期: 2008-01-14 出版日期: 2008-07-25

通讯作者: 王栋

	服务
	把本文推荐给朋友
	加入引用管理器
	E-mail Alert
	RSS
	作者相关文章
	朱化彬
	韩伟东
	王宗礼
	郝海生
	王栋
	沙里金
	陈龙
	杜卫华
	程金华

引用本文:

陈龙,朱化彬,沙里金,韩伟东,王栋,王宗礼,郝海生,杜卫华,程金华. 牛精子蛋白质组学技术平台的建立及冻融前后精子差异蛋白初步分析[J]. 中国生物工程杂志, 2008, 28(7): 37-42.

Long CHEN hua-bin ZHU Zong-li WANG . Establishment of proteomics methods of bovine spermatozoa and initial analysis of the differential proteins between the fresh and frozen-thawed spermatozoa. China Biotechnology, 2008, 28(7): 37-42.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/ 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2008/V28/I7/37

[1]	常卓, 侯玲玲, 周雅琼, 彭洪尚, 柯屾. 哺乳动物精子体外诱导的研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(3): 135-142.
[2]	张媛媛, 胡启蒙, 王亮亮, 李新红. 哺乳动物精子磷酸化蛋白质组学研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 2012, 32(04): 76-82.
[3]	陈晓丽朱化彬郝海生杜卫华赵学明孙艳艳胡传活王栋. 猪精子冷冻损伤的研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 2010, 30(07): 0-0.
[4]	韩伟东1,2,王栋1,郝海生1,赵学明1,杜卫华1,朱化彬1. 蛋白质组学技术在精子蛋白研究中的应用[J]. 中国生物工程杂志, 2009, 29(06): 120-124.
[5]	王永贵,朱化彬,柳强,王栋. 精子性染色体相关基因转录本及检测方法研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 2008, 28(9): 119-123.
[6]	孔丽娟,李忠浩,黄静燕,代婷婷,王根林. 酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能豚鼠精子上的分布与表达[J]. 中国生物工程杂志, 2007, 27(4): 89-93.
[7]	张明陆阳清卢克焕. 牛分离精子对其IVF胚胎染色体影响的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2007, 27(1): 98-101.
[8]	王振玲,王栋,朱化彬,程金华,李玉冰,郝海生,杜卫华,沙里金. 二维电泳分离牛精子蛋白的技术研究[J]. 中国生物工程杂志, 2006, 26(09): 61-66.
[9]	叶华虎,袁菊芳,温叶飞,周艳荣,熊福银,邓继先,刘彦. 利用免疫细胞化学方法快速检测精子对外源DNA的结合能力[J]. 中国生物工程杂志, 2006, 26(0): 69-72.
[10]	白玲, 张志刚, 王润华, 蔡豪斌. 精子肽的固相合成及应用初探[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(8): 96-98.
[11]	黄吴键, 安靓. 利用雄性生殖细胞建立转基因动物[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(3): 17-21.
[12]	宛传丹, 黄宇烽, 许晓风. 人精子蛋白SP22的cDNA克隆、表达及纯化分析[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(12): 59-63.
[13]	张明, 卢克焕. 用分离精子进行性别控制研究的现状[J]. 中国生物工程杂志, 2003, 23(7): 57-61.
[14]	韩毅冰, 翟茂君, 秦鹏春. 哺乳动物受精与透明质酸[J]. 中国生物工程杂志, 1999, 19(3): 14-17,56.
[15]	刘红林, 陈宜峰. 精子介导外源DNA转移的研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 1997, 17(2): 26-29.

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed