假密环菌cDNA文库的构建及其阿拉伯糖苷酶基因的克隆(英文)

中国生物工程杂志

2005, Vol. 25

Issue (6): 65-70

论文

假密环菌cDNA文库的构建及其阿拉伯糖苷酶基因的克隆(英文)

姚冬生¹, 黄辉¹, 赵龙², 谢春芳¹, 刘大岭¹

1. 暨南大学生命科学与技术学院生物技术实验室广州 510632;
2. 清华大学生物科学与技术系北京 100084

全文: PDF(785 KB) HTML

摘要：

用SMART技术构建了载体为λTriplEx2的假密环菌的表达型cDNA文库。文库滴度为1．0×106pfu／ml,重组率约为98．3％,扩增后滴度为3．1×108pfu／ml,容量约为4．2×1010。从文库中随机挑选176个克隆进行5’端测序,得到147条表达序列标签(EST),并将测序结果提交到EMBL数据库。随机测序结果表明:插入片段长度均在200-800之间。测序结果经过生物信息学分析,发现有43条序列与已知序列有明显同源性,其中序列AJ620046与多形拟杆菌的阿拉伯糖苷酶序列有很高的序列一致性。用SMART-RACE技术成功获得了AJ620046的全长cDNA,克隆了AJ620046的开放阅读框AF,并成功构建了重组质粒pHIL-S1-AF,在毕赤酵母菌中进行了初步表达。

关键词： 假密环菌; 生物信息学; 阿拉伯糖苷酶; 克隆

出版日期: 2005-06-25

基金资助:

This work was supported by Grants from National“863”High-Tech Project(No．2002AA213011); National Natural Science Foundation(No．30270043)and Guangdong Key Task Project(No．C30109)

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引用本文:

姚冬生, 黄辉, 赵龙, 谢春芳, 刘大岭. 假密环菌cDNA文库的构建及其阿拉伯糖苷酶基因的克隆(英文)[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(6): 65-70.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2005/V25/I6/65

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