用填充床生物反应器连续灌流培养CHO细胞生产HBsAg

中国生物工程杂志

2004, Vol. 24

Issue (7): 82-84

论文

用填充床生物反应器连续灌流培养CHO细胞生产HBsAg

龚伟¹, 方学平¹, 刘燕¹, 王晓燕¹, 范昌发¹, 梅兴国¹, 章扬培²

1. 军事医学科学院毒物药物研究所, 北京 100850;
2. 军事医学科学院输血研究所, 北京 100850

全文: PDF(161 KB) HTML

摘要：

为了获得重组CHO细胞持续高效表达HBsAg的最佳条件 ,应用填充床生物反应器和聚酯片 ,连续灌流培养分泌HBsAg的重组CHO细胞 ,考察灌流培养基中葡萄糖浓度对细胞代谢和HBsAg生产的影响。连续培养 60天 ,细胞密度可达 5 0× 1 0 6 ml。灌流培养液中葡萄糖浓度从5 0g L增加到 7 6g L时 ,葡萄糖消耗速率和乳酸浓度均随之上升。当葡萄糖浓度继续增加至9 3g L时 ,葡萄糖消耗速率和乳酸浓度呈下降趋势 ;当将葡萄糖浓度降回至 7 6g L后又开始回升。培养过程中最高抗原滴度达 1∶5 1 2 ,出现在以含 5 0g L葡萄糖的培养液灌流阶段的末期 ,即第 2 6天 ,维持 1 0天左右即迅速下降至 1∶1 2 8水平。共收液 335L ,纯化后获得抗原蛋白2 1 3 0 4mg ,平均产率为 635 94μg L ,较传统转瓶工艺 ( 4 1 4μg L)提高 5 3 6%。表明CHO细胞较长时间处于高乳酸水平下 ( >30mmol L)会严重影响产物的表达 ,应控制灌流培养液中的葡萄糖浓度在较低水平 ,或通过适当提高灌流速率使培养基中乳酸水平维持在较低水平 ,从而有利于HBsAg的高效稳定表达

关键词： 填充床生物反应器; HBsAg; 细胞培养; 聚酯片

收稿日期: 2004-02-23 出版日期: 2004-07-25

基金资助:

国家“973”计划资助项目(2002CB713804)

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引用本文:

龚伟, 方学平, 刘燕, 王晓燕, 范昌发, 梅兴国, 章扬培. 用填充床生物反应器连续灌流培养CHO细胞生产HBsAg[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(7): 82-84.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2004/V24/I7/82

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