用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端LBP

中国生物工程杂志

2004, Vol. 24

Issue (12): 69-73

论文

用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端LBP

王长松¹, 刘友生¹, 葛晓冬¹, 李红¹, 陈燕平²

1. 第三军医大学西南医院病理学研究所, 重庆 400038;
2. 第三军医大学研究生管理大队三队, 重庆 400038

全文: PDF(274 KB) HTML

摘要：

根据已有的资料显示LBP与LPS的结合位点位于其氨基末端的第 91～ 1 0 0个氨基酸残基。在体外构建含有人LBP与LPS结合活性部分的穿梭质粒pBacmidtLBP ,并且带上 6×his的标签 ,用此穿梭质粒转染sf2 1昆虫细胞 ,获得重组病毒。然后用重组病毒液感染对数生长期的sf2 1昆虫细胞 ,72h后收获含有这种截断型人源化氨基末端LBP-(NH-LBP)的培养上清。用金属亲和树脂纯化后 ,采用SDS-PAGE电泳以及Western-Blot鉴定所得到的纯化物。成功获得相对分子质量约为 30 0 0 0的NH-LBP。为进一步研究LBP在介导LPS活化靶细胞中的作用机制奠定了基础。

关键词： NH-LBP; 杆状病毒表达系统; 金属亲和层析; 鉴定

收稿日期: 2004-06-21 出版日期: 2004-12-25

基金资助:

国家自然科学基金资助项目(30271342)

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王长松, 刘友生, 葛晓冬, 李红, 陈燕平. 用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端LBP[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(12): 69-73.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2004/V24/I12/69

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