苄非他明人工抗原合成

doi:10.13523/j.cb.2104037

中国生物工程杂志

2021, Vol. 41

Issue (7): 58-65 DOI: 10.13523/j.cb.2104037

技术与方法

苄非他明人工抗原合成

康可人^1,²,袁强^1,^2,^*(

),梁飞敏¹,伍丽贤¹

1 广州万孚生物技术股份有限公司广州 510663
2 广州正孚检测有限公司广东正孚法医毒物司法鉴定所广州 510663

Synthesis of Benzfetamine Artificial Antigen

KANG Ke-ren^1,²,YUAN Qiang^1,^2,^*(

),LIANG Fei-min¹,WU Li-xian¹

1 Guangzhou Wondfo Biotech Co., Ltd, R&D Center, Guangzhou 510663, China
2 Guangzhou Zhengfu Testing Co., Ltd, Guangzhou A&C Institution of Forensic Toxicology, Guangzhou 510663, China

全文: PDF(1446 KB) HTML

摘要：

目的: 通过化学方法对苄非他明进行结构修饰并保留抗原决定簇,将结构改造后的产物与载体偶联合成苄非他明抗原。方法: 苄非他明经化学修饰后,增加活性基团连接上一类可用的经化学修饰的连接臂,使用碳二亚胺法与载体蛋白偶联成苄非他明人工合成抗原。该抗原通过紫外吸收光光谱扫描技术、SDS-PAGE电泳法及胶体金免疫层析法进行偶联效果和抗原活性的鉴定。结果: 苄非他明半抗原结构与载体偶联成功,该抗原具有较高的纯度和活性,与苄非他明抗体反应表现出较高的特异性。结论: 该方法合成的苄非他明抗原可用于免疫检测方法,也可作免疫原制备相关抗体。

关键词： 苄非他明; 人工抗原; 碳二亚胺法; 免疫检测

Abstract:

Objective: To produce benzyphetamine antigen by coupling modified benzyphetamine using the chemical method with carrier protein and its epitope was preserved.Methods: Benzafetamine artificial antigen was prepared by conjugation of carrier protein with benzafetamine hapten that was synthesized by adding active groups to a class of available chemically modified link arms by the carbodiimide method.The results were identified by UV absorption spectroscopy, SDS-PAGE and colloidal gold immunochromatography.Results: Through these tests, the Benzfetamine from this experimental scheme was successfully coupled to the carrier.This antigen had high purity,good activity and good anti-cross interference reaction,which also had high specificity with Benzfetamine antibody.Conclusion: The Benzfetamine antigen synthesized by this method can be used in immunoassay methods, and can also be used as an immunogen to prepare relevant antibodies.

Key words: Benzfetamine Artificial antigen Carbodiimide method Immunoassay

收稿日期: 2021-04-21 出版日期: 2021-08-03

ZTFLH:

S852

通讯作者: 袁强 E-mail: yuanqiang25775@163.com

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康可人,袁强,梁飞敏,伍丽贤. 苄非他明人工抗原合成[J]. 中国生物工程杂志, 2021, 41(7): 58-65.

KANG Ke-ren,YUAN Qiang,LIANG Fei-min,WU Li-xian. Synthesis of Benzfetamine Artificial Antigen. China Biotechnology, 2021, 41(7): 58-65.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/10.13523/j.cb.2104037 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2021/V41/I7/58

图1 4-(苄基(1-苯基丙烷-2-基)氨基)丁酸

图2 4-(苄基(1-苯基丙烷-2-基)氨基)丁酸ESI-MS分析

图3 苄非他明抗原合成路线

图4 苄非他明半抗原、牛血清蛋白及苄非他明抗原的紫外光谱

图5 苄非他明抗原蛋白质电泳

图6 胶体金免疫层析分析试纸

图7 胶体金免疫层析分析试纸灵敏度试验结果

编号	药物名称	浓度 /(μg/mL)	测试结果	编号	药物名称	浓度 /(μg/mL)	测试结果
1	盐酸麻黄碱	100	-	47	格列本脲	100	-
2	盐酸哌替啶	100	-	48	硝酸异山梨酯片	100	-
3	福尔可定	100	-	49	酚妥拉明	100	-
4	O3单乙酰吗啡	100	-	50	盐酸文拉法辛	100	-
5	磷酸可待因	100	-	51	赖诺普利片	100	-
6	枸橼酸芬太尼	100	-	52	孟鲁司特钠片	100	-
7	美沙酮	100	-	53	氢氯噻嗪	100	-
8	蒂巴因	0.1	-	54	辛伐他汀片	100	-
9	乙酰可待因	100	-	55	螺内酯片	100	-
10	罂粟碱	100	-	56	阿托伐他汀钙片	100	-
11	盐酸纳洛酮	100	-	57	非诺贝特	100	-
12	盐酸纳曲酮	100	-	58	卡马西平	100	-
13	盐酸普鲁卡因	100	-	59	盐酸利多卡因注射液	100	-
14	奥美拉唑	100	-	60	尼莫地平片	100	-
15	萘磺酸右丙氧芬	100	-	61	多潘立酮片(吗丁啉)	100	-
16	司可巴比妥	100	-	62	枸橼酸莫沙必利分散片	100	-
17	安非他命	10	-	63	盐酸胺碘酮片	100	-
18	苯巴比妥	100	-	64	克拉霉素胶囊	100	-
19	盐酸氟西汀	10	-	65	盐酸环丙沙星片	100	-
20	盐酸可卡因	100	-	66	对乙酰氨基酚片	100	-
21	盐酸地芬诺酯	100	-	67	地红霉素肠溶胶囊	100	-
22	盐酸伪麻黄碱	50	-	68	硝苯地平片	100	-
23	盐酸雷尼替丁	100	-	69	头孢克洛胶囊	100	-
24	盐酸摇头丸	10	-	70	氯氮平	100	-
25	盐酸曲马多	100	-	71	卡托普利片	100	-
26	吗啡	100	-	72	头孢拉定胶囊	100	-
27	氯胺酮	100	-	73	青霉素V钾片	100	-
28	苯甲酰爱康宁	100	-	74	甲磺酸氨氯地平片	100	-
29	阿司匹林	100	-	75	马来酸依那普利片	100	-
30	巴比妥	100	-	76	酒石酸美托洛尔片	100	-
31	甲基苯丙胺	10	-	77	利福平胶囊	100	-
32	埃索美拉唑镁	100	-	78	盐酸吡格列酮分散片	100	-
33	咖啡因	10	-	79	氯雷他定片(百为乐)	100	-
34	Magnesium	100	-	80	尼可刹米	100	-
35	葡萄糖	100	-	81	呋塞米片	1	-
36	丙硫氧嘧啶片	50	-	82	硫酸氢氯吡格雷片	100	-
37	米非司酮片	100	-	83	硝酸甘油片	100	-
38	四环素片	100	-	84	阿托品	100	-
39	格列齐特片	100	-	85	左炔诺孕酮片	100	-
40	阿昔洛韦片	100	-	86	Heartburn Relief	100	-
41	左氧氟沙星	100	-	87	Acid Reducer	100	-
42	酮康唑片(里素劳)	100	-	88	Airshield	100	-
43	氨苄西林胶囊	100	-	89	I Caps	100	-
44	维生素C片	100	-	90	Fuel	100	-
45	氨茶碱片	0.1	-	91	Sinus&Allergy	100	-
46	兰索拉唑片	50	-

表1 胶体金免疫层析分析试纸的干扰药物试验结果

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