效应蛋白LepB的表达，纯化及其亚克隆片段的结晶研究

doi:10.13523/j.cb.20140501

中国生物工程杂志

2014, Vol. 34

Issue (5): 1-5 DOI: 10.13523/j.cb.20140501

研究报告

效应蛋白LepB的表达，纯化及其亚克隆片段的结晶研究

徐安毕^1,2, 黄来强^1,2

1 清华大学生命科学学院北京 100084;
2 清华大学深圳研究生院深圳 518055

The Expression, Purification and Studying for Crystallization of Subclone of Effector Protein LepB

Xu An-bi^1,2, HUANG Lai-qiang^1,2

1 School of Life Sciences, Tsinghua University, Beijing 100084, China;
2 Graduate School at Shenzhen, Tsinghua University, Shenzhen 518055, China

全文: PDF(638 KB) HTML

摘要：

为了研究嗜肺军团菌通过其效应蛋白发挥的致病机理，效应蛋白的结构和生物学功能研究是至关重要的。我们构建了效应蛋白LepB全长载体PFastBac1，应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了全长LepB蛋白，并构建9个LepB亚克隆的原核表达载体PGEX-1，通过GST亲和层析，离子交换层析，凝胶过滤层析，纯化得到了纯度较高的蛋白片段。通过悬滴气相扩散法进行蛋白结晶筛选，获得了效应蛋白LepB片段480~679的蛋白晶体，为解析效应蛋白LepB的结构和生物学功能研究奠定基础。

关键词： 效应蛋白; LepB; 结晶

Abstract:

The structural study of effector protein is important for studying thepathogenesis of legionella pneumophila. A construct for plasmid of LepB-PFastBac1-GST and 9 constructs for plasmids of LepB-truncation-PGEX-1-GST were successfully constructed and induced to express in insect cell or bacteria Bl21 (DE3)，the obtained recombined protein was purified and crystallized by the vapor diffusion method. The crystal of the trunction of LepB -480-679 grows. The results Provide a basis for helping resolve the structure of LepB and further research work on the pathogenesis of legionella pneumophila.

Key words: Effector protein LepB Crystallization

收稿日期: 2014-03-19 出版日期: 2014-05-25

ZTFLH:

Q816

基金资助:

国家自然基金资助项目（31130063）

通讯作者: 黄来强 E-mail: huanglq@tsinghua.edu.cn

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引用本文:

徐安毕, 黄来强. 效应蛋白LepB的表达，纯化及其亚克隆片段的结晶研究[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(5): 1-5.

Xu An-bi, HUANG Lai-qiang. The Expression, Purification and Studying for Crystallization of Subclone of Effector Protein LepB. China Biotechnology, 2014, 34(5): 1-5.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/10.13523/j.cb.20140501 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2014/V34/I5/1

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