兔早期胚胎发育相关新基因IFRG的克隆和表达

中国生物工程杂志

研究报告

兔早期胚胎发育相关新基因IFRG的克隆和表达

齐冰何新徐来祥陈清轩

中国科学院遗传与发育研究所中国科学院遗传与发育研究所中国科学院遗传与发育生物学研究所

Cloning and expression of rabbit early embryo developmental new gene IFRG

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摘要： 近来的研究表明干扰素在哺乳动物早期胚胎发育中有重要的作用。我们首次克隆了兔早期胚胎发育相关新基因IFRG（干扰素应答基因）的全长cDNA序列（AJ584672），根据该cDNA序列以兔卵巢cDNA为模板经PCR扩增后克隆了兔IFRG cDNA的完整开放阅读框(396bp)。将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上，在大肠杆菌BL21中进行了GST-IFRG融合蛋白的表达。经IPTG诱导培养后，SDS-PAGE电泳检测结果显示在41kDa处有特异性表达蛋白，回收融合蛋白作为抗原免疫小鼠，制备多克隆抗体，通过Western杂交表明该融合蛋白具有生物免疫活性。

关键词： 融合蛋白; 家兔; IFRG

Abstract: Recent research has proved that interferons play very important role in early embryo development. We first cloned the full length cDNA (AJ584672) of rabbit early embryo developmental new gene IFRG (interferon responsive gene). According to rabbit IFRG cDNA, intact open reading frame (full length was 396bp) was amplified using rabbit ovary cDNA as template. The purified rabbit IFRG cDNA was inserted into pGEX-4T-2 vector to construct the prokaryotic expression vector. IFRG protein was expressed in E. coli in the form of glutathione-S-transferase (GST) fusion protein. The recombinant expression plasmid was transformed into BL21 and gene expression was induced by IPTG. Expression protein were detected by SDS-PAGE and confirmed by Western blotting analysis, which showed the molecular weight of the protein was a 41kDa and had immunity activity.

收稿日期: 2006-03-22 出版日期: 2006-06-25

通讯作者: 齐冰

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齐冰,何新,徐来祥,陈清轩. 兔早期胚胎发育相关新基因IFRG的克隆和表达[J]. 中国生物工程杂志, .

. Cloning and expression of rabbit early embryo developmental new gene IFRG. China Biotechnology, .

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https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/ 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2006/V26/I06/55

[1]	陈英,肖海鹏,张晓焰,龚庆伟,马利,李文佳,陈小锋. GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白的表达与鉴定 ^*[J]. 中国生物工程杂志, 2018, 38(7): 58-66.
[2]	邵莉, 马晓慧, 王相阳, 徐寒梅. 长效化融合蛋白药物及其药动学分析技术的研究进展[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(4): 83-88.
[3]	曹荣月, 俞敏霞, 张昕黎, 李曼曼, 苗梓韬, 金亮. VEGFⅡ/GRP融合蛋白的构建、表达、纯化及其抗小鼠RM-1前列腺癌的作用研究[J]. 中国生物工程杂志, 2016, 36(8): 9-15.
[4]	陈华新, 武静, 赵瑾, 姜鹏. 抗人AFP单链抗体与藻胆蛋白融合蛋白的构建、表达与活性分析[J]. 中国生物工程杂志, 2016, 36(5): 74-80.
[5]	高相雷, 林树珊, 龚庆伟, 潘兰, 马利, 冯艳, 林小鹊, 曾剑, 李文佳, 陈小锋, 陈英. 重组人胰高血糖素样肽-1类似物的分离纯化和鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2016, 36(12): 15-20.
[6]	钱建瑛, 许正宏, 窦文芳. 融合蛋白GGH粉针剂制备工艺研究[J]. 中国生物工程杂志, 2016, 36(11): 48-53.
[7]	龚隆财, 罗镇明, 杨雁青, 王振宇, 向军俭, 王宏. cTnI-linker-TnC融合蛋白的原核表达及鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(4): 48-53.
[8]	晏丽, 王康, 李瑞建, 白义, 白先宏, 周海平. 一种新型高糖基化免疫融合蛋白NESP-Fc的研制[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(4): 80-85.
[9]	艾君, 姜潮, 刘敏, 王晓艳, 田海山, 李校堃. 拟南芥双油体蛋白融合表达KGF-2及其生物学活性研究[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(1): 21-26.
[10]	邵妤, 曲国龙, 金晶, 王微, 谭俊杰, 阚乃鹏, 李玉霞, 刘刚, 陈惠鹏. 利用BglBrick方法进行HSA/Exendin-4长效融合蛋白的快速组装[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(4): 59-64.
[11]	杨凡, 黄虎, 李屹晨, 邓衡露, 吴茂柏, 钟翎, 侯永敏. 新型长效重组促卵泡素的纯化和性质及药代动力学研究[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(2): 45-51.
[12]	王启帆, 薛莹, 冯新为, 张革. 靶向抗肿瘤蛋白iRGD-CDD的原核表达及生物活性鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(12): 1-9.
[13]	李晨, 顾华, 郭佳, 孙慧, 黄经纬, 蒋明, 靳令经, 房健民. Tat-MANF融合蛋白的制备及生物活性研究[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(06): 7-15.
[14]	孙静, 王斌, 段志青, 胡凝珠, 李建芳, 李彦涵, 胡云章. 重组人LIF融合蛋白表达纯化及其活性鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(5): 50-55.
[15]	张砚君, 刘荣, 张梦楠, 苗庆芳, 甄永苏, 熊冬生, 张益芝. IL3融合蛋白稳定性分析、改造及活性研究[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(3): 117-122.

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