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基因重组大肠杆菌表达HrpNEcc蛋白的发酵条件及诱导条件优化

中国生物工程杂志

2009, Vol. 29

Issue (10): 44-49

研究报告

基因重组大肠杆菌表达HrpNEcc蛋白的发酵条件及诱导条件优化

高俊莲¹,张姝²,王敏¹,韩梅琳²,马荣才³,陈强²

1.四川农业大学资源环境学院微生物学系雅安 6250142
2.北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心北京 100097

Optimization of Fermentation and Induction Conditions of Recombinant E.coli BL21(DE3)/pET30a(+)hrpNEcc

ZHANG Shu^1,2,WANG Min²,HAN Mei-lin²,MA Rong-cai²,CHEN Qiang¹,GAO Jun-lian²

1.Department of Microbiology, College of Resources and Environment Science, Sichuan Agricultural University, Ya′an 625014,China
2.Agro-Biotechnology Research Centre, Beijing Academy of Agriculture and Forestry, Beijing 100097,China

全文: PDF(669 KB) HTML

摘要：

对已构建好的表达HrpNEcc蛋白的工程菌BL21(DE3)/pET30a(+)hrpN Ecc的摇瓶发酵条件及乳糖诱导进行优化，通过在7L发酵罐中放大发酵实验，以期提高蛋白产量并降低生产成本。在摇瓶中优化的发酵及诱导条件是：5% 的接种量，TB培养基，菌体培养至对数生长前期，添加3g/L外源诱导剂乳糖时，HrpNEcc蛋白产量可达417.60mg/L，比不添加乳糖时提高了36.73%，比用IPTG诱导时提高了16.85%。7L发酵罐中发酵，获得菌体湿重达到57.24g/L（WCW），可溶性HrpNEcc蛋白产量占细胞总蛋白的50.2%，为3.29 g/L。

关键词： HrpNEcc蛋白; 重组大肠杆菌; 发酵及诱导条件优化

Abstract:

In order to obtain high yield of the HrpNEcc protein with a lower total cost, fermentation and lactose induction conditions for recombinant E. coli BL21(DE3)/pET30a(+)hrpN Ecc were optimized in flasks and the recombinant E.coli was fermentated in 7L fermenter. The optimized incoulum concentration was 5% and the optimized nutrient medium was TB medium. The HrpNEcc protein yield reached 417.60mg/L by adding 3g/L exogenous inducer lactose in the growth prophase of log-phase for the recombinant E.coli. The HrpNEcc protein yield was higher 36.73% than that of the case of no any inducer, and was higher 16.85% than that of the case of adding IPTG. The wet weight of cell pellet of the recombinant E.coli reached 57.24g/L after fermentation in 7L fermenter, the HrpNEcc protein reached 3.29g/L, about 50.2% of total cellular protein.

Key words: HrpNEcc protein recombinant E. coli Optimization of fermentation and induction conditions

收稿日期: 2009-05-25 出版日期: 2009-10-29

ZTFLH:

Q93-335

基金资助:

北京市科学技术委员会农业科技成果转化专项（Z07090500550705)、北京市科学技术委员会重大项目专项(Z0005190040531) 资助项目

通讯作者: 高俊莲 E-mail: gaojunlian@baafs.net.cn;qiangchencq@yahoo.com.cn

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引用本文:

张姝王敏韩梅琳马荣才陈强高俊莲.
基因重组大肠杆菌表达HrpNEcc蛋白的发酵条件及诱导条件优化[J]. 中国生物工程杂志, 2009, 29(10): 44-49.

ZHANG Shu, WANG Min, HAN Mei-Lin, MA Rong-Cai, CHEN Jiang, GAO Dun-Lian. Optimization of Fermentation and Induction Conditions of Recombinant E.coli BL21(DE3)/pET30a(+)hrpNEcc. China Biotechnology, 2009, 29(10): 44-49.

链接本文:

https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/ 或 https://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/Y2009/V29/I10/44

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